GeXP多重分析技术检测肝癌组织长链非编码RNA表达的实验研究

史俊英 王晔 陈文 刘成玉 牟晓峰★

肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是一种常见的严重威胁人类健康的恶性肿瘤，其死亡率在所有癌症中居第二位［1］。临床上诊断HCC的常用方法有血清学、细胞学、病理学及影像学，但都有一定的局限性和漏检率［2⁃3］。随着精准医疗的迅速发展，高通量技术如各种基因芯片的研发为基因序列测定及发现新的融合基因提供了有利工具，但是其过程繁琐、成本较高。因此，积极探索有效的诊断及预后标志物是提高HCC患者总生存率和综合治疗水平的有效手段。

长链非编码 RNA（long non⁃coding RNA，LncRNA）是一类转录本长度超过200 nt的无蛋白质编码功能的RNA，在转录及转录后调控、表观遗传调控等方面调控基因的表达水平［4-5］。近期研究表明，不同LncRNAs在HCC组织中差异表达，有促进或抑制HCC发生发展的作用［6］，为HCC进程及预后评估提供了有利靶点，有望成为临床应用的新的肿瘤标志物。

GeXP多重基因表达遗传分析系统是把PCR技术和毛细管电泳分离技术紧密结合在一起，能在同一反应管中对多达35个基因同时进行定量检测和分析，具有较好的特异性和灵敏度。其在个体化用药指导，疗效与预后评估和病原体鉴定等方面应用广泛［7］。因此本研究基于GeXP多重基因表达分析系统，建立一种同时在一个反应管中检测8种Ln⁃cRNAs的检测方法，用于探讨LncRNA是否可作为HCC的潜在标志物，为其诊断及预后做出积极贡献。

1 材料与方法

1.1 材料

收集青岛大学第二临床医学院2015年7月至2016年12月经影像学检查或病理组织学确诊且术前未经过化疗、栓塞、射频等治疗的HCCⅢ期手术切除标本23例，并以癌旁非肿瘤肝组织作为对照，其中男13例，女10例，年龄46～68岁，中位年龄54岁。……