人脐静脉内皮细胞培养技术的研究进展

白雪晶，冯 磊，徐文波,罗 旋，鄢东海(.昆明医科大学第六附属医院，云南省玉溪市人民医院，云南 玉溪 65300；.昆明医科大学，云南 昆明 650500)

血管内皮细胞连续覆在血管内膜，其具有重要的生理功能，广泛参与了炎性反应、血管新生、免疫应答、动脉粥样硬化、血管张力调节等生理及病理过程[1]。血管内皮细胞功能失调与许多心血管疾病的发生有关，冠心病的发生与血管内皮细胞的损伤与其功能异常有密切的关系[2]。内皮细胞的体外培养是研究内皮细胞生物学与多种疾病关系的重要方法，是目前最简单可靠的被广泛运用于生理研究的人类血管细胞。随着细胞培养技术不断进步，文献报道了一种仪器，使用这种仪器内，皮细胞可以从人类的脐静脉中分离出来而不受污染[3]。但是作为基础实验，笔者仍然需要探索一种适用于科研工作者的分离纯化HUVECs的方法。

1973年Jaffe等首先报道了内皮细胞体外培养的方法[4]，以后人们在此基础上不断完善和改进，以获得性状稳定、纯度较高的血管内皮细胞，并可较长时间培养(可传6～10 代)，内皮细胞的体外培养关键在于获取、纯化。作为HUVECs培养的第一步，细胞的获取方法对细胞纯度及含量至关重要，在培养细胞的获取方法上,有酶法和非酶法两种。

1 细胞获取方式

1.1非酶法：非酶法主要包括机械刮取、组织块移植两种。但是机械刮取方法易损伤细胞，组织块移植易混杂其他血管壁细胞，近几年来这两种方法已较少使用。

1.2酶消化法：这种方法的主要步骤是用酶灌注脐静脉，收集内皮细胞后接种培养。……