蔬果中有机磷农药残留快速测定法的意义和方法

邓丽花

（甘肃省武山县农产品质量安全监督检测站，甘肃 武山 741300）

1 蔬果中有机磷农药残留快速测定的意义

农药在我国蔬菜生产中发挥着极其重要的作用，而这些物质的不合理使用又会导致蔬菜及其制品中农药残留量超标，进而影响消费者食用安全和进出口贸易。有机磷农药作为一类高效、广谱的杀虫剂正被广泛地用于农业防害以及家庭、仓储等的杀虫，但大量使用后产生的环境危害也日益严重。农药的急性中毒，特别是果蔬食品污染后引发的群体中毒事件屡有发生。对蔬菜中农药的残留量进行及时而准确的分析、检测是控制蔬菜中农药残留量的关键环节之一。因此建立果蔬有机磷残留检测技术是很有必要的。因此，要规范各大蔬菜基地、农贸市场、超市蔬菜农残检测方法，统一了检测标准，而且推进了农产品质量安全监管体系建设，确保了食用农产品的第一道安全屏障，防止了农残超标蔬菜的生产和销售，控制了残留农药通过食物链的传递和浓缩，减少了对人体的危害和急性中毒事件的发生。食用蔬菜的污染因子主要是使用了有机磷类和氨基甲酸酯类农药，目前农药残留速测的方法主要有生物测定法、酶学法和化学法，而其中酶学法和化学法都具有快速、简便、灵敏和成本低等特点。

2 蔬果中有机磷农药残留快速测定技术方法

2.1 酶试剂法的原理

在一定条件下，有机磷类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用，它会抑制人体中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酯酶的活性，造成神经传导介质乙酰胆碱的积累，影响其正常传导，使人致死。其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常情况下，酶催化神经传导代谢产物（乙酰胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率，通过抑制率可以判断出样品中是否有高剂量有机磷类农药的存在。

2.2 试剂的配制

一是提取液的配制。将一袋提取液粉剂倒入500ml的玻璃瓶内加入510ml蒸馏水摇匀溶解后备用。可在常温下保存。二是显色剂的配制。在小瓶内加入32ml提取液，摇匀后即可使用，避光冷藏保存。三是底物的配制。每瓶底物粉剂中加入3.1ml蒸馏水，摇匀后即可使用，配好的底物溶液需在0～4℃保存备用，可使用7天。四是乙酰胆碱酯酶的制备。每瓶酶液中加入3.1mL提取液，摇匀后即可使用。配好的酶液需在0～4℃保存备用，可使用7天。（乙酰胆碱酯酶、底物粉剂未配制时，必须放置在冰箱0℃以下冷冻室保存，有效期为一年。）

2.3 仪器使用

仪器为浙江托普云农科技有限公司生产的NY-16DY型农药残留速测仪。开机后点击登录进入检测界面，点仪器预热3min，再点空白对照后做对照测试，它有16个通道室，第一孔只能做对照测试，对照吸光度必须大于0.3。显色时间19min，数据传输到“打印机”，自检则检测各通道的光能量。进行对照测试时，试样室第1通道放置对照试样，第2-16通道可放置样品试样，试样放入试样室后，合上试样室盖，勾选对应通道选框，仪器进行测试。

2.4 果蔬中农药残留的测试

2.4.1 对照液配制。用移液管提取2.5ml提取液至干净试管中，用微量移液器提取0.1ml酶液和0.1ml显色剂到试管内。混匀后放置15min（若室温达不到25℃以上，建议放在37℃恒温水中15min）时间到达时，马上加入0.1ml底物混匀，立即倒入比色皿中放入仪器的比色池内，盖好盖板，执行对照制作程序。对照值在30以上为有效值。

2.4.2 样品检液提取和配置。取表面干净的蔬菜或瓜果，用天平准确称取2g，叶菜取叶片部分，瓜果取皮带肉。葱、蒜、萝卜和一些叶绿素含量较高的蔬菜中，含有的植物次生物质对酶的活性产生影响，容易产生假阳性。必须进行处理，对于葱，先去掉须根，再把其根部剪掉，用天平称取重量，放入三角瓶中，吸取缓冲液的毫升数是其重量数的5倍，振荡后过滤即为待测样，蒜、萝卜、叶绿素含量高的蔬菜，称取整株的重量。其他样品将叶片、瓜肉等剪成1cm见方大小置于小烧杯内，用移液器提取10ml提取液浸泡，在常温下放置10分钟，每3分钟晃动一下烧杯，使蔬菜中的农药能充分溶入液体内。若用振荡器，震荡2分钟。

将烧杯中的提取液倒入试管内，略沉淀后用移液管或移液枪吸取2.5ml移入另一试管内，即为检液。

在检液管内加0.1ml酶液和0.1ml显色剂混匀后放置15min（若室温达不到25℃以上，建议放在37℃恒温水浴中15min），当15min后马上加入0.1ml底物混匀，马上倒入比色皿中放入比色池，盖好盖板，执行样品检测程序。

2.5 测试结果的判断

若被测样品的酶抑制率超过50%，则表明被测蔬菜中含有高剂量的有机磷农药，样品为阳性结果。阳性结果的样品需要重复检验2次以上。