基质辅助激光解析/电离质谱用于呼吸道合胞病毒感染细胞的差异性分析

邓文婵

摘 要 呼吸道合胞病毒（Respiratory syncytial virus，RSV）是引起婴幼儿急性下呼吸道感染及免疫缺陷的常见病原，也是老年、 病弱群体中诱发免疫抑制的重要病原。本研究利用基质辅助激光解析/电离质谱（MALDIMS），对RSV 病毒感染宿主细胞的变化进行考察。结果表明，在分子量为5000～10000 Da范围内，有3组信号峰在正常组和感染组中表达均有显著变化，其中1个差异组分在RSV感染之后表达上调（m/z 6154.25），2个差异组分在RSV感染后表达下调（m/z 7658.47和9259.82）。本方法无需对细胞样品进行复杂处理，采用MALDIMS证明了感染细胞与未感染细胞前后表达存在显著差异，直接获得细胞在病毒感染后产生的反应应答模式和细胞生理功能改变的信息，为呼吸道合胞病毒疾病诊断与病理研究提供了实验基础。

关键词 基质辅助激光解析/电离质谱； 呼吸道合胞病毒； 疾病标志物

1 引 言

呼吸道合胞病毒（Respiratory syncytial virus，RSV）是一种RNA病毒，是引起婴幼儿急性下呼吸道感染的主要病毒病原，可引起间质性肺炎及毛细支气管炎[1，2]。其感染在全球范围都有发生，且全年均可发病，对人类健康影响较大。目前用于RSV病毒研究的主要方法有酶联免疫吸附测定[3]、 直接免疫荧光法[4]、 实时PCR技术及微阵列技术等[5]，而用质谱分析方法研究RSV病毒的报道还较少。基于蛋白组学的研究方法，建立快速识别未感染细胞与感染细胞且鉴定表达差异的有效方法，对研究RSV病毒病理和细胞生理功能改变具有重要意义。基质辅助激光解析/电离质谱（Matrixassisted laser desorption/ionization mass spectrometry，MALDIMS）作为软电离质谱的代表，具有灵敏度高、 分辨率高等优势，已在蛋白质、 多肽、 核酸等生物大分子检测尤其是蛋白质组学、 多肽组学和质谱成像分析等研究中得到广泛应用[6～10]。……