陈锐 孙晓宇 邓媛 路鹏鹏 赵玲侠 瞿佳 沈卫荣
(陕西省微生物研究所,西安 710043)
农业生产中化学农药的不科学施用以及连作土壤自净化能力的降低,致使农产品及农业用地的土壤农药残留问题日益突出[1-2]。残留农药对生态环境[3]及人类身体健康[4]产生了巨大威胁。多菌灵是一种氨基甲酸甲酯类杀菌剂,过量使用不仅会改变土壤中的微生物群落结构[5],还会对土壤中的无脊椎动物造成影响[6],有研究表明多菌灵对人生殖细胞、神经细胞有毒害作用[7-8]。利用微生物的生命代谢活动,从土壤中筛选能够有效降解特定农药的微生物菌株[9-10],将其制备成降解菌剂,可在短时有效降低土壤中农药残留的水平,使土壤恢复健康状态[11]。目前已有很多文献报道筛选获得摇瓶发酵高效降解多菌灵的菌株,但这些菌株在盆栽及田间实验中降解效果不佳。分析其原因可能与菌株耐受土壤复杂的生境有关。本研究通过唯一碳源平板筛选法,从长期使用多菌灵的棚室土壤中筛选出高效分解利用多菌灵的降解菌株,该菌可以在较宽泛的条件下生存,对环境条件耐受度高,以该菌作为出发菌株,或能解决土壤中残留农药多菌灵的问题。
1.1 材料
采集土壤样本于陕西省大荔县埝桥乡东埝村(N34°49'30″,E109°51'52″,海拔 357 m)菜农长期使用多菌灵的棚室,采用5点采样法,采样后将土壤样本均匀混合。
1.2 方法
1.2.1 多菌灵降解菌的分离 细菌无机盐培养基:NH4NO31.0 g,MgSO4·7H2O 0.5 g,(NH4)2SO40.5 g,KH2PO40.5 g,NaCl 0.5 g,K2HPO41.5 g,酵母提取物0.05 g。平板筛选实验用多菌灵为四川国光50%可湿性粉剂,待灭菌细菌无机盐固体培养基冷却至60℃后加入50%多菌灵(碳源终浓度0.2%)。……