怀山药内生真菌的分离与鉴定

文春南 王晓龙 李守婷 张朋展 叶颖晓 麻兵继

摘要：以怀山药（Dioscorea opposita Thunb）为试验材料，采用组织块分离法和研磨分离法对怀山药根茎中内生真菌进行分离，并运用形态学及分子生物学方法对其进行鉴定。结果表明，共分离得到23株真菌，经鉴定分别为镰孢菌属（Fusarium）、青霉属（Penicillium）、曲霉属（Aspergillus）、地霉菌属（Geotrichum）、弯孢菌属（Curvularia）和链格孢属（Alternaria）等6个属。

关键词：怀山药（Dioscorea opposita Thunb）；内生真菌；分子生物学方法；镰孢菌

中图分类号：R284.2 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2018）08-0058-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2018.08.015

Isolation and Identification of Endophytic Fungi from Dioscorea opposita Thunb

WEN Chun-nan，WANG Xiao-long，LI Shou-ting，ZHANG Peng-zhan，YE Ying-xiao，MA Bing-ji

（College of Agronomy，Henan Agricultural University，Zhengzhou 450002，China）

Abstract： The rhizome of Dioscorea opposita Thunb was used as the experimental material，and then endophytic fungi were isolated by the methods of tissue and grinding separation. The isolated strains were then identified by morphology and molecular biology approaches. The results showed that 23 strains from D. opposita Thunb were identified，which belonged to 6 genera，namely，Fusarium，Penicillium，Aspergillus，Geotrichum，Curvularia and Alternaria.

Key words： Dioscorea opposita Thunb； endophytic fungi； molecular biology approaches； Fusarium

怀山药（Dioscorea opposita Thunb）为薯蓣科多年生植物薯蓣的根状茎，自古以来即是河南省著名的“四大怀药”之一，具有健脾胃、益肺肾、止痢疾、化痰涎等功效，又被称为“怀参”[1]。药典收载的怀山药的药材生产具有明显的地域性，即河南怀庆府（古怀庆府即今河南省焦作一带，含博爱、武陟、沁阳、温县等地）为主要产地[2]。鉴于怀山药具有药食兼用的功效且口感好，国内外市场对怀山药的需求量巨大。当前对怀山药的文献研究多集中于药材人工栽培及其生物功能等方面，而人工栽培的研究又主要集中在怀山药的外部生长环境研究，即气候因子、光照、温度、土壤、水分等[3，4]，对怀山药植株内环境如内生真菌的研究较少。植物内生真菌是指那些在其生活史中某一段时期生活在活的植物组织内，对宿主植物组织不引起明显病害症状的真菌[5]。虽然中药材内生真菌和药材质量之间存在密切联系，是药材道地性形成的关键因子之一，相关研究文献也较多[6，7]。但怀山药内生真菌与药材品质之间的关联性尚缺乏研究。……