脂肪酸转运蛋白-4在乳腺癌细胞转移中的作用及机制

毛英 黄湖南 王建荣 桂雄建 吴冰中国人民解放军第一八四医院普外科（江西鹰潭335000）；赣南医学院解剖教研室（江西赣州34000）

乳腺癌的女性发病率最高的恶性肿瘤，其高转移性是导致病死率高的主要原因，因此进一步探讨其转移的机制是乳腺癌治疗的热点问题［1-3］。脂肪酸转运蛋白4（fatty acid binding protein 4，FABP4）是一类将脂肪酸转运到各种细胞间的脂肪素，是脂肪代谢的重要调节因子，研究还发现其可以调节基因的表达、细胞的增殖分化等［4-5］。进一步的研究还发现，FABP4是促进宫颈癌［6］、肝癌［7］等细胞增殖、转移的重要因素。新近的研究也发现FABP4与乳腺癌的增殖密切相关［8］，但其在乳腺癌转移中的具体作用和机制鲜有报道。因此本研究进一步探讨在乳腺癌转移中的作用和机制，为乳腺癌的诊治提供新的靶点。

1 材料与方法

1.1 材料 Transwell小室（Corning公司，美国），FABP4兔来源多克隆一抗（Abcam公司，美国），β⁃actin鼠来源单克隆一抗（CST公司，美国），抗兔或鼠HRP标记二抗（中杉金桥，北京），高糖型DMEM、胎牛血清（Gibco公司，美国），胰蛋白酶（吉诺公司，中国），新霉素和嘌呤霉素（sigma，美国），IL⁃33中和抗体（R&D Systems，美国）。

1.2 细胞培养 乳腺癌细胞ZR⁃75⁃30，BT⁃474，T⁃470，MCF⁃7，BT549和MDA⁃MB⁃231 由本院实验室保存细胞。用含10%胎牛血清的DMEM培养基，在5%CO2的37℃孵箱中培养。

1.3 免疫组化 收集我院2015年1月至2017年12月乳腺癌患者手术标本的病理石蜡切片，其中未转移癌28例、转移癌41例。石蜡切片经脱蜡、抗原修复、5%羊血清封闭、FABP4一抗（1∶200）4℃孵育过夜，HRP标记兔二抗室温1 h，DAB显色。染色评分参考MENG等［9］的方法。

1.4 干扰RNA（shRNA）转染 shRNA由上海吉玛生物公司合成，系列参考TANG等［10］的报道。MDA⁃MB⁃231细胞转染按lip⁃2000的说明书进行。……