干扰素β和γ基因修饰的人羊水间充质干细胞的制备

刘安琪 杜晶春 蓝晓 陈柳池 徐霞

广州医科大学金域检验学院（广州510182）

间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）是能够从多种组织来源的基质细胞分离出来的一种具有分化潜能的干细胞，在骨髓中最先被发现，现在还可从脐带、外周血、脂肪组织、骨骼肌、羊水等［1］组织中分离获得。能够分化为脂肪细胞、成骨细胞和软骨细胞等多种组织细胞。羊水来源的间充质干细胞具有发育阶段原始、易于获得、不涉及伦理问题等优点。

干扰素（interferon，IFN）是由英国科学家Isaacs于1957年利用鸡胚绒毛尿囊膜研究流感病毒干扰现象时首先发现的，是一类具有广泛生物活性的细胞因子，具有抑制细胞分裂、调节免疫、抗病毒、抗肿瘤等多种作用。可是干扰素在体内半衰期很短，全身给药达到治疗效果的干扰素剂量对机体器官的毒性相当大，因此限制了干扰素的广泛应用。

MSCs易于体外扩增培养，具有天然免疫豁免特性以及向肿瘤细胞迁移的能力［2］，且易于被逆转录病毒、慢病毒、腺病毒等载体转染。有文献报道，慢病毒载体更适用于干细胞，其对分裂和非分裂细胞都具有感染能力［3］。因此，本实验考虑用hIFN⁃β、hIFN⁃γ修饰人羊水间充质干细胞（human amniotic fluid derived mesenchymal stem cells，AFM⁃SCs），并成功实现其表达和分泌，从而为探索肿瘤的靶向基因治疗提供合适的细胞载体。

1 材料与方法

1.1 细胞 人羊水来源间充质干细胞：在广州医科大学附属第一医院临床产前诊断正常标本中收集羊水组织培养获得。293FT细胞：购于中国科学院细胞库。

1.2 试剂和仪器 试剂：低糖DMEM培养……