TAT介导多肽药物过表达纯化和穿膜活性检测

王中山，张梦，张美娴，陈淑漫，朱焘，方佳炜，杨静，戴毅

1.徐州医科大学 a.江苏省麻醉学重点实验室；b.麻醉学院；c.临床学院；江苏 徐州 221004；2.徐州市中心医院，东南大学附属医院 妇产科，江苏 徐州 221009

疼痛是一种复杂的主观感觉，包含疼痛感觉、疼痛情绪和认知功能障碍等，作为临床上最常见的疾病症状之一，疼痛严重影响患者的生活质量。为了缓解和治疗疼痛，研究人员对疼痛和镇痛的机制做了深入的探索。

实验室和临床脑成像研究证实，前扣带皮层是疼痛感觉和调制的关键脑区，是调控生理、病理疼痛状态的基础[1-2]。神经元兴奋性持续改变伴随可塑性改变是前扣带皮层参与调节慢性疼痛的主要机制[3-5]，这种改变依赖于NMDA受体及其下游信号通路的调控[6]。很多证据显示NMDA受体2B亚基（NMDAreceptor2Bsubunit，NR2B）介导的前扣带皮层神经元可塑性在炎症相关或神经损伤相关持久痛中发挥重要作用[7-8]，而前扣带皮层脑区NR2B参与慢性疼痛的机制研究显示微囊蛋白1（caveolin-1）可能参与这一过程。微囊蛋白1在大脑皮层[9]、海马[10]、下丘脑[11]等脑区神经元细胞中均有表达。微囊蛋白1存在于兴奋性突触中，在突触后密集区浓度较高，并参与调控Ⅰ类代谢型谷氨酸受体的转移和信号传导[12]。

本实验室研究发现，微囊蛋白1能够通过和NR2B之间的相互作用，介导后者的细胞膜表达水平，参与突触的形成和可塑性变化进而参与调节疼痛，而NR2B羧基端来源的多肽（NR2Pep）则能够阻断这种相互作用[13]，起到很好的镇痛效果，为慢性神经病理性疼痛机制研究和临床治疗提供了重要参考。……