两种组合显色系统用于分枝杆菌快速药物敏感性试验的性能研究

孙战强

结核病是全球范围内重大传染病之一[1]。随着耐多药结核病和广泛耐药结核病疫情的快速上升，简单、快速和高效的结核分枝杆菌药物敏感性试验(简称“药敏试验”)技术成为迫切需求。基于耐药突变基因的分子生物学方法因结核分枝杆菌耐药机制的复杂性，仍不能完全满足临床需求[2]。而细菌学药敏试验和最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration，MIC)的测定成为抗结核新药筛选[3]和个体化精准治疗的重要手段。近年来，基于氧化还原代谢原理并广泛应用于细胞培养、细菌增殖的方法，如阿尔玛蓝法、刃天青法、四唑盐法等显色方法，因简单、快速、价廉等优势在结核分枝杆菌的快速药敏试验中得到广泛应用[4-7]。其中，四唑盐法，尤其是新一代的水溶性四唑盐3,3′-[1-(苯氨酰基)-3,4-四氮唑]-二(4-甲氧基-6-硝基)苯磺酸钠(XTT)因其背景值低、显色快、试剂组合多变、价格低廉等特点使其更具有抗结核药物高通量筛选和快速进行药敏试验的潜能。通常，XTT通过细胞跨膜电子传递系统发生带颜色变化的还原反应，但XTT带有较高的负电荷难以接近或透过细胞膜，显色速度缓慢，一旦加入合适的中间电子受体进行介导则可提高反应速度[8-9]。前期研究中，笔者发现XTT/1-甲氧基-5-甲基酚嗪硫酸甲酯(mPMS)组合显色系统(简称“XTT/mPMS”)可用于抗结核药物高通量筛选[10]。在此基础上，笔者进一步深入检测XTT/mPMS及其对照XTT/2-甲基-1,4-萘醌(mNQ)组合显色系统(简称“XTT/mNQ”)用于分枝杆菌快速药敏试验的性能，并对XTT/mPMS用于结核分枝杆菌临床分离株快速药敏测定的性能进行评估。……