过量硒加重二硝基氯苯诱导的小鼠特应性皮炎样表现

莫俊銮 张丽君 周继昌 龚春梅 徐远飞 杨慧

518020深圳市慢性病防治中心分子生物学实验室

特应性皮炎（atopic dermatitis，AD）是慢性复发性皮肤病，发病机制尚不清楚，有研究认为，异常免疫反应是其发病机制之一，而免疫调节失衡在AD疾病进展中起重要作用。硒（selenium，Se）是人体必需的微量元素，它在减轻氧化应激，调节中性粒细胞、NK细胞、B淋巴细胞和T细胞功能，以及改善免疫状态和抗炎作用方面发挥作用［1］。我们将AD免疫学特点和硒生物学功能结合，设计膳食硒干预二硝基氯苯（dinitrochlorobenzene，DNCB）致敏诱导的AD样小鼠实验，观察膳食硒水平对小鼠AD样表现的影响。

材料和方法

一、材料

40只SPF级BALB/c小鼠来自广东省医学实验动物中心，合格证号44007200001631、44007200001820，许可证号SCXK（粤）2008-0002，3周龄，雌性，体重（10±1）g。硒饲料来自美国Harland Teklad公司，硒含量分别为0.01、0.25和3.00 mg/kg。DNCB来自美国Sigma公司。鼠IgE ELISA试剂盒来自中国台湾Abnova公司。Multiskan FC酶标仪来自美国Thermo公司。7700 X电感耦合等离子体质谱仪来自美国Agilent公司。

二、方法

1.膳食硒干预和致敏刺激动物实验：40只小鼠随机分为缺硒组（日粮硒含量0.01 mg/kg）、正常硒组（0.25 mg/kg）、过量硒组（3.00 mg/kg）和对照组（0.25 mg/kg）［2］。所有小鼠先缺硒饲料饲养4周，再分别以缺硒、正常硒、过量硒和正常硒饲料喂养4周。随后对缺硒、正常硒和过量硒组用致敏原（DNCB橄榄油丙酮溶液）激发AD样表现，对照组用空白基质溶液涂抹。激发方法在参照文献［3］基础上进行优化：激发前24 h剃掉小鼠背部毛发（6～8 cm2面积），观察24 h内剃毛部位有无皮损和炎症发生。按4∶1配制橄榄油和丙酮混合溶液，以此为基质溶液配制质量浓度为1%和0.1%的DNCB致敏溶液。……