HPLC测定维生素ADE注射液中三种维生素的含量

吴春燕，张金宝，刘海艳，李文财，冯 岩，王 莉，任建军，张玉彦*

(1.宁夏兽药饲料监察所，银川 750011；2. 西北农林科技大学动物科技学院，杨凌 712100；3. 宁夏智弘生物科技有限公司，银川 750021)

维生素ADE注射液是以维生素A、维生素D和维生素E为主药，辅以其他溶剂，制备成的营养补充类物质，用于预防和治疗动物维生素A、维生素D和维生素E缺乏症[1-3]，该制剂正在申报5.1类新兽药。目前，测定脂溶性维生素A、维生素D3和维生素E的方法主要包含分光光度法和HPLC法[4-5]，其中分光光度法是通过测定吸收度而确定样品含量，因样品中的辅料会对吸收度造成干扰而影响含量检测，须经过皂化和提取等预处理过程后进行检测；HPLC法具有灵敏度高、操作简单和重现性好等特点，但是样品同样须经过繁琐的预处理过程后，方能进行含量检测。根据维生素A、维生素D3和维生素E均溶于乙醇的物理特性，结合相似相溶原理，采用无水乙醇直接提取的方法，并建立了以甲醇为流动相A、乙腈-乙醇-水(60∶25∶5)为流动相B的反相HPLC法，能有效分离维生素A、维生素D3和维生素E，来满足实际生产过程中对检验时间及结果的需求。结果表明该方法操作简单、结果准确，可用于成品及中间体的检测。

1 材 料

1.1 仪器 上海梅特勒托利多仪器有限公司AB265-S电子天平；日本岛津LC-2010C高效液相色谱仪。

1.2 试药与试剂 维生素A棕榈酸酯对照品，购自德国J&K Scientific Ltd，批号为LJ10P49，含量1790,000 U/g；维生素D3对照品，购自中国食品药品检定研究院，批号为100061-201208，含量99.8%；维生素E对照品，购自中国食品药品检定研究院，批号为100062-201110，含量97.7%；……