间变性淋巴瘤激酶在神经母细胞瘤患儿病理组织中的表达及临床意义

黄体龙 李丽娟(通讯作者)

（昆明市儿童医院血液科 云南 昆明 650000）

神经母细胞瘤（NB）占小儿恶性实体肿瘤10%和儿童肿瘤死亡率的15%[1],NB预后较差。笔者采用IHC方法分析ALK在NB患儿的表达特点。

1.资料与方法

1.1 一般资料

收集2010年10月至2016年1月昆明市儿童医院血液肿瘤科收治的90例经病理初次证实NB患儿临床资料，平均年龄（9.53±3.62）岁，35例患儿进行Nmyc基因扩增检测，8例阳性，27例阴性，根据INSS分期将Ⅰ+Ⅱ+ⅣS期NB患儿分为低危组，INSSⅢ+Ⅳ期分为高危组，根据INSS分期和Nmyc基因扩增检测对NB患儿采取手术或化疗。

1.2 ALK检测方法

免疫组织化学检测：手术或组织活检取得组织标本后，制作10%福尔马林固定石蜡包埋细胞学蜡块，常规切片，脱蜡，EDTA热修复法修复抗原，滴加一抗，37℃温箱中孵育40min，PBS缓冲液中冲洗5次，滴加二抗，37℃温箱中孵育30min，PBS缓冲液中冲洗5次，加DAB显色剂，清水冲洗5min,苏木精染色2rnin,中性树胶封片。高倍镜下取4个不同视野共计数800个细胞，计算ALK阳性细胞比例，0～4分代表ALK细胞比例，未发现ALK细胞为0分，ALK阳性细胞数≤10%为1分，11%＜ALK阳性细胞数＜50%为2分，51%＜ALK阳性细胞数＜75%为3分，ALK阳性细胞数＞75%为4分。0分～3分表示染色强度，分值越高，染色越重。ALK细胞比例评分和染色评分结果的积为最终结果，0分为阴性（-），1～3为弱阳性（+），3～7为中度阳性（++），7～12分为强阳性（+++）。-、+为低表达，++、+++为高表达。

1.3 随访

所有患者随访期间截止2018年2月。

1.4 统计学分析

SPSS22.0进行数据分析，P＜0.05为差异具有统计学意义。

2.结果

2.1 ALK表达情况

ALK高表达于NB患儿临床特征见表1。

表1 ALK高表达于NB患儿临床特征的关系[例（%）]

2.2 NB患儿生存状态

NB患儿存活状态见表2。

表2 NB患儿存活状态的（n，%）

3.讨论

正常情况下，ALK表达于人体胚胎的神经系统[2]，出生以后ALK除在脑组织中较少表达外，其他组织均不表达ALK，ALK基因异常可导致细胞增殖与凋亡失调，引起肿瘤。目前ALK与NB疾病预后的关系尚不明确。

本研究发现ALK高表达与年龄存在一定的关系，NB低危组和高危组、ALK高度表达组和低度表达组的生存率明显不同，INSS分期高危NB患儿死亡率显著高于INSS分期低危组，ALK高度表达NB死亡率显著高于ALK低表达患儿。

总之，我们认为ALK在国内NB患儿中阳性表达率较高，ALK高表达与NB患儿不良预后有着密切的关系。