大鼠肺微血管内皮细胞原代细胞制备及纯化的方法改进

陈巧红，盛楠，孙静，冯波,3，胡格

（1.北京农学院动物科学技术学院/兽医学中医药北京市重点实验室，北京 102206；2.北京动物园，北京 100044；3.中国农业大学动物医院，北京 100193）

0 引言

微血管内皮细胞（microvascular endothelial cells，MVECs） 不仅可以完成基本的血液和组织液的代谢交换，并且可以合成和分泌多种细胞因子，发挥重要的生物学功能[1]。微血管内皮细胞呈单层覆盖于微血管内表面，是构成血管内外物质交换的一道重要屏障，也是循环血流剪切力和血液中危险因素的主要靶细胞，因而最易并且最早受到伤害[2]。内皮细胞既是细胞因子作用的靶细胞又是细胞因子的重要来源，其分泌的细胞因子有集落刺激因子（GM-CSF、G-CSF）、炎症介质（IL-1、1L-6、IL-8、TNF-a）、血小板生成素等[3]。MVECs是抗原呈递细胞的一种，在一定条件下能够显著性地表达组织相容性复合体Ⅱ（MHCⅡ）类分子，以MHCⅡ类分子限制性方式将抗原肽呈递给淋巴细胞，促进免疫应答的进程[4]，参与炎症反应。近年来，内皮细胞在调节微循环、炎症反应和免疫反应等方面的功能成为研究热点，研究发现，微血管内皮细胞具有功能多样性，它不仅是构成血管组织间屏障的重要成分，而且在调节细胞免疫功能[5]，保护机体内环境的稳定，维持正常生理和免疫功能以及介导疾病的发生、发展和转归[6]等方面都发挥着重要的作用。

体外试验发现，登革热病毒、汉坦病毒、巨细胞病毒、埃博拉病毒、H5N1亚型禽流感病毒和H9N2亚型禽流感病毒等均可以感染血管内皮细胞。有研究表明，H5N1亚型禽流感病毒可以在血管内皮细胞系和人肺微血管内皮细胞（PMVECs）内复制[7]。……