RIP1/RIP3通路在大鼠急性脑梗死中的作用

钟春荣 符传艺 杨杰

1中南大学湘雅医院神经内科（长沙 410008）；海南省人民医院2保健中心四区，3神经外科（海口 570311）

急性脑梗死（acute cerebral infarction）常见于脑血栓形成及脑动脉粥样硬化等原因，引发脑血管狭窄，血流减少，严重者脑血管闭塞，进而出现局灶性脑缺血，引起相应支配区域的脑组织坏死［1-2]。急性脑梗死具有高致残率、高病死率及高复发率特点，神经挽救及功能康复不甚理想，因此，研究并阐释急性脑梗死神经元死亡的病理生理过程及其调控是治疗的关键点。神经元死亡包括自噬、程序性坏死及凋亡等方式，随着研究深入，发现程序性坏死在急性脑梗死中扮演着重要的角色［1]。另外研究表明，RIPs是受体相互作用蛋白（receptor interacting proteins），其活化可参与调控细胞程序性坏死，抑制其产生炎症反应，尤其是RIP1/RIP3通路发挥着关键作用［3-4]。因此，本课题组通过制作大鼠急性脑梗死模型，研究RIP1/RIP3表达及其对炎症反应的影响，探讨程序性坏死信号通路RIP1/RIP3在急性脑梗死中发挥作用的机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物健康雄性Wistar大鼠，体质量180～200 g，平均（180±20）g（由中南大学实验动物中心提供）。大鼠饲养于SPF级清洁动物培养室，温度22～25℃，相对湿度40%～60%，12 h/12 h日夜光照条件下饲养。

1.2 试剂与仪器羊抗鼠RIP1一抗和羊抗鼠RIP3一抗、HRP标记兔抗羊二抗（武汉博士德生物有限公司），Western blot相关试剂（北京中杉金桥生物技术有限公司），肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）ELISA试剂盒（美国R&D公司），Nec-1（美国Alexis生物技术公司），酶标仪（美国BD公司）等。

1.3 方法

1.3.1 动物分组将36只Wistar大鼠正常适应性饲养……