NSE、LDH和CK联合检测对早产儿脑损伤早期诊断的价值

李海燕，秦道建， 张士发

(皖南医学院第一附属医院 弋矶山医院 儿科，安徽 芜湖 241001)

随着医疗水平的发展，我国早产儿的存活率逐渐增高，随之发生脑损伤的早产儿人数也较前增多[1]。早产儿脑损伤 (brain injury in premature infants,BIPI)是指由于产前、产时和(或)产后的各种病理因素导致早产儿出现不同程度的脑出血和(或)缺血性改变,并出现脑损伤的相应症状和体征,病情严重者可遗留不同程度的神经系统后遗症[2-3]，如运动发育迟缓、认知障碍、甚至脑瘫等，严重者可致新生儿死亡。目前针对早产儿脑损伤的诊断主要是通过临床表现及头颅超声、脑电图及头颅MRI等检查并结合高危因素等综合评价，但是临床表现缺乏特异性，而超声、脑电图等检查存在各自的局限性，给早产儿脑损伤的早期诊断带来很大困扰[3]。因此探究早期诊断早产儿脑损伤的方法成为当下研究的热点。NSE主要存在于神经细胞及神经内分泌细胞中，特异性地反映灰质损伤，而早产儿脑损伤多为白质损伤[4-5]，NSE在诊断早产儿脑损伤时缺乏灵敏度。有研究表明脑损伤患者血清中LDH及CK也出现不同程度的升高[6]，但两者组织中分布广泛，对早产儿脑损伤的诊断特异性低。本研究通过对早产儿脑损伤患者的血液中NSE、LDH及CK等血清酶进行综合分析，探究其对早产儿脑损伤早期诊断的价值，为临床早产儿脑损伤诊治提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 随机选取2016年1月～2018年1月弋矶山医院NICU的86例早产儿，根据 2012 版《早产儿脑损伤诊断与专家共识》排除低血糖脑病、宫内TORCH 感染、胆红素脑病、中枢系统感染及遗传代谢异常引起的脑损害等[7]，将入选早产儿分为脑损伤组(60例)及无脑损伤组(26例)。各组患儿的一般情况见表1。

1.2 检测试剂与仪器 运用化学发光法检测血清NSE水平，试剂盒由罗氏诊断产品(上海)有限公司提供，检测仪器为罗氏cobas e 601。使用日立7600全自动生化分析仪检测血清CK、CKMB、LDH、HBDH、ALT、AST、ASTm、GGT、ALP、CYS-C、SOD和CHE水平，专用试剂盒由北京利德曼生化股份有限公司生产。所有检验均严格按照试剂盒说明书操作。

1.3 统计学处理 采用SPSS 18.0统计软件对数据进行分析，定性资料采用百分率(%)表示，组间比较采用卡方检验；正态分布的计量资料采用均数±标准差表示，组间比较采用独立样本t检验；非正态分布的计量资料以中位数四分位数间距[P50(P25,P75)]表示，组间比较采用Wilcoxon秩和检验；采用ROC曲线对相应生化指标进行单项及联合检测，对早产儿脑损伤的诊断价值进行分析。

2 结果

2.1 两组早产儿基本情况比较 两组早产儿基本情况包括胎龄、性别、出生体质量、分娩方式及孕母年龄，差异无统计学意义(P>0.05)；宫内感染在两组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 两组早产儿基本情况比较

2.2 两组早产儿生化指标比较 脑损伤组早产儿血清NSE、CK、LDH、HBDH、AST、ASTm水平均高于无脑损伤组，差异有统计学意义(P<0.05)；但血清CKMB、ALT、GGT、ALP、CYS-C、SOD和CHE在两组间比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

2.3 相关生化指标ROC曲线 根据血清NSE、CK、LDH、AST单项检测，NSE与CK、LDH、AST两两联合检测及NSE、CK、LDH三者联合检测在两组早产儿中浓度值绘制ROC曲线。获取血清NSE、CK、LDH、AST的最佳截断值分别为61.865 μg/L、434.5 U/L、452.0 U/L、56.0 U/L。血清NSE、CK、LDH、AST单项检测的曲线下面积分别为0.790、0.665、0.755、0.663。血清NSE+CK、NSE+LDH、NSE+AST联合检测的曲线下面积分别为0.826、0.840、0.793。血清NSE+CK+LDH联合检测的曲线下面积为0.846。见图1。

表2 两组早产儿生化指标比较

2.4 相关生化指标的诊断价值分析 相关生化指标检测阳性表示检测结果高于最佳截断值。即NSE≥61.865 μg/L、CK≥434.5 U/L、LDH≥452.0 U/L、AST≥56.0 U/L。相关生化指标单项检测，NSE单项检测在诊断早产儿脑损伤中的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和置信区间均高于CK、LDH和AST单项检测；血清NSE和LDH联合检测的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和置信区间均高于NSE+CK与NSE+AST联合检测；血清NSE+CK+LDH联合检测在诊断早产儿脑损伤中的诊断价值高于相关生化指标单项检测和联合检测。见表3。

图1 相关生化指标单项及联合检测的ROC曲线

表3 相关生化指标的诊断价值分析

3 讨论

早产儿脑损伤的生理基础为不成熟的脑血管发育：生发基质区缺少弹力纤维等支持，自我调节能力差，易引发血管破裂；脑室周围的长短支汇合较少，当血压降低时，易导致缺血性脑损伤[8]；脑白质主要为神经胶质细胞前体，易损性大，易受缺氧、氧化应激等影响而引起脑损伤[9]。

NSE在神经细胞胞质中作为关键酶参与糖酵解途径，且不与肌浆蛋白结合。在生理情况下，NSE不能从完整的神经元分泌到细胞外。当发生脑损伤时，血脑屏障的通透性增加，NSE从受损的细胞中流出至脑脊液，通过血脑屏障进入血液中，引起血液中NSE浓度升高[10]。本研究结果显示，脑损伤组血清NSE水平高于无脑损伤组，差异具有统计学意义。有研究表明，NSE在72 h内呈逐渐上升,后呈下降趋势[11]。NSE主要反映灰质损伤，且在血小板及红细胞等中的含量低，在脑白质出血性损伤时升高不明显，因此单独检测NSE对早产儿脑损伤进行评估尚存在不足之处。

CK在神经元及胶质细胞中主要存在于胞质及线粒体中，脑损伤时，可渗透到血液中，使血液中的CK浓度增高。本研究亦证明血清CK水平在脑损伤组与无脑损伤组之间有差异性，因CK在组织中分布广泛，虽对判断是否有脑损伤存在一定的评估意义，但仍缺乏灵敏度。LDH广泛分布于心肌、骨骼肌、肾脏、脑等多种组织中，本研究中LDH及HBDH的值在两组中有差异。可能存在两方面原因：①存在于神经元细胞器中靠近胞膜处的LDH，在细胞损伤时，透过细胞膜及损伤的血脑屏障进入血液使其水平升高；②窒息等引起早产儿脑损伤的危险因素可能对心脏、肝脏等其他器官也产生一定损害，从而致LDH及HBDH升高。张建秀等[12]研究发现，在新生儿脑病患儿中，LDH在第3天升至最高，第7天下降，10天左右降至正常。我们的研究还发现，血清AST和ASTm主要存在于心肌、肝脏、骨骼肌等组织中，对脑组织损伤缺乏特异性，虽在两组早产儿间存在差异，但ROC曲线下面积较小，诊断效能差。

各单项检测ROC曲线及诊断价值分析显示灵敏度和特异度均较低。早产儿脑损伤时各项指标单项检测易受组织分布及时间差异性的影响，造成脑损伤的漏诊。为更高效地对早产儿脑损伤进行评估，我们将NSE与CK、LDH、AST两两联合后进行比较，发现NSE与LDH联合后诊断灵敏度及特异度等均高于其他组两两之间联合，曲线下面积、灵敏度、特异度均最大(0.840、66.67%、100%)，因此NSE与LDH联合对早产儿脑损伤的诊断效能更大。最后将NSE、LDH和CK三者进行联合后，曲线下面积(0.846)较前再次增加，且灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、置信区间等诊断价值均较前增加，因此三者联合后能进行互相补充，对早产儿脑损伤的诊断价值更大。

综上所述，血液中NSE、CK、LDH、及AST水平检测对早产儿脑损伤的诊断可能具有一定的价值，尤其将NSE、CK与LDH三者进行联合检测后，对早产儿脑损伤的诊断价值更大。