睿臻对肺癌的抑制作用及其机制

黄璐璐 杜倩倩 闫辰 刘春霞 李芋润 高林 李燕 赵青

摘要 目的：初步探讨由山楂、沙棘和枸杞三味中药为主，并添加虫草素、虫草多糖、β-葡聚糖和番茄红素等制备而成的天然药物组方睿臻的体内外抗肺癌活性及其机制。方法：采用MTT法检测睿臻体外抗肿瘤活性，小鼠Lewis移植瘤模型观察单独使用睿臻及联合紫素的抗肺癌活性及对荷瘤小鼠生存时间的影响。FCM实验检测其对肿瘤细胞凋亡的影响，重组基质膜侵袭实验观察对肿瘤细胞侵袭能力的影响，Westernblot方法初步探讨该化合物的作用机制。结果：睿臻对肺癌细胞具有较好的增殖抑制活性，其作用于A549细胞株、NCI-H460细胞株和NCI-H1975细胞株120h后的IC50值分别为98.42μg/mL、60.02μg/mL和60.41μg/mL；睿臻也可显著抑制小鼠Lewis肺癌的生长，9.0g/kg睿臻对小鼠Lewis肺癌的生长抑制率达70.0%，且可在增强紫素的抗肿瘤活性的同时升高胸腺指数及外周血中红细胞数量和血红蛋白水平。睿臻可延长Lewis肺癌小鼠的生存时间。睿臻可诱导肺癌细胞A549和NCI-H460发生凋亡。在96.0μg/mL和192.0μg/mL劑量下，可显著抑制肺癌细胞穿过重组基底膜的数量。Westernblot结果显示睿臻可抑制Raf/MEK/ERK、FAK/p38等信号通路。结论：睿臻在体内外均具有一定的抗肺癌活性，其作用机制可能与阻断Raf/MEK/ERK信号转导通路有关，有望开发成为肺癌治疗的天然药物制剂。

关键词 睿臻；肺癌；增殖；凋亡；侵袭；增效减毒；Raf/MEK/ERK；FAK/p38

AbstractObjective：Toinvestigatetheanti-tumoreffectandmechanismsofRuiZhenwhichcontainshawthorn，hippophae，medlar，cordycepin，cordycepspolysaccharide，β-glucanandlycopeneon.Methods：MTTassaywasusedtoanalyzeanti-proliferationactivityofRuiZheninvitro.Anti-tumoractivityandtheeffectofsurvivaltimewereobservedbymouseLewisxenograftmodelinvivo.TheeffectofRuiZhenonapoptosiswasmeasuredbyFCManalysis.WesternblotwasperformedtoinvestigatetheexpressionlevelofproteinsintumortissuestreatedwithRuiZhen.Results：RuiZhenhasagoodproliferationinhibitoryactivityonlungcancercells.TheIC50valuesofA549cellline，NCI-H460celllineandNCI-H1975celllineafter120hwere98.42μg/mL，60.02μg/mLand60.41μg/mLrespectively.RuiZhencanalsosignificantlyinhibitthegrowthofLewislungcancerinmice，andthegrowthinhibitionrateof9.0g/kgrutheniumonLewislungcancerinmicewas70.0%，anditcanenhancethepurplepigment.Theanti-tumoractivityincreasedboththethymusindexandthenumberofredbloodcellsandhemoglobinintheperipheralblood.RuiZhencanprolongthesurvivaltimeofLewislungcancermice.RuiZhencaninduceapoptosisoflungcancercellsA549andNCI-H460.At96.0μg/mLand192.0μg/mL，thenumberoflungcancercellspassingthroughthereconstitutedbasementmembranewassignificantlyinhibited.WesternblotresultsshowedthatrutheniumcaninhibitRaf/MEK/ERK，FAK/p38andothersignalingpathways.Conclusion：RuiZhenhascertainanti-lungcanceractivityinvitroandinvivo，anditsmechanismmayberelatedtoblockingRaf/MEK/ERKsignaltransductionpathway.Itisexpectedtodevelopintoanaturalpharmaceuticalpreparationforlungcancertreatment.

KeyWordsRuiZhen；Lungcancer；Proliferation；Apoptosis；Invading；Efficacyenhancingandtoxicityreducing；Raf/MEK/ERK；FAK/p38

中图分类号：R284；R734.2文献标识码：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2018.06.049

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