参附强心合剂对心衰大鼠心肌能量代谢AMPK-PGC-1α通路的影响

周 凡 方 伟 祝光礼

心力衰竭是临床极为常见的危重症，是目前心血管领域非常重要的一项公共健康问题。调查研究[1-2]表明，国外人群中心力衰竭的得病率约为1.5%～2%，65岁以上人群得病率达到6%-10%，我国的得病率相比国外稍低，但也达到0.9%。心衰时心肌能量代谢发生改变，葡萄糖代谢和脂质异常，引起代谢循环代谢底物—游离脂肪酸（free fatty acids，FFA）逐渐增多，加重能量代谢障碍，损伤线粒体功能，AMPKPGC-1α通路在心力衰竭能量代谢重构中意义重大。本课题采用腹主动脉缩窄法制做心衰大鼠模型，以曲美他嗪为阳性对照，通过对血清B型脑尿钠肽（Brain natriuretic peptide，BNP）、FFA、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）及单磷酸腺苷激活的蛋白激酶（AMP-activated protein kinase，AMPK）、磷酸化 AMPK（phosphorylation ofAMP-activated protein kinase，P-AMPKα）、过氧化物酶体增殖活化受体γ辅助活化因子1α（peroxisome pro-liferatorsactivated receptor-γ coactivator-1α，PGC-1α） 的检测，观察指标进一步明确参附强心合剂对心衰大鼠心肌能量代谢AMPK-PGC-1α通路的影响，以此阐明参附强心合剂对治疗心衰的机制。

1 实验材料

1.1 动 物 SD雄性大鼠，清洁级，体质量（140±10）g，由浙江省实验动物中心提供。动物质量许可证号：SCXK（浙）2013-0016。分笼饲养，保持室内恒温，温度（24±1）℃，相对湿度（55±5）%，通风 8～15 次/h，标准饲料，适应性喂养1周后进行实验。

1.2 主要药物 参附强心合剂（红参3g，附子5g，葶苈子10g，玉竹15g，煎煮浓缩成2g/mL的生药煎剂，由杭州市中医院制剂室提供）；盐酸曲美他嗪片（规格：30mg/片，批号2006150，施维雅制药有限公司生产）。

1.3 主要试剂 戊巴比妥钠（上海西堂生物科技有限公司，批号151121），BCA蛋白定量试剂盒（北京普利莱 GE公司，批号 PLL-2016-11），PVDF膜（杭州达文生物有限公司，批号R8AA4656C）、Anti-AMPK alpha 1抗体（abcam）、Anti-PGC1 alpha抗体（abcam）。

2 实验方法

2.1 动物模型及分组 选取雄性SD大鼠共60只，从中随机取8只作为假手术组，余为手术组。……