老年冠心病患者内皮祖细胞CD34+水平与冠状动脉病变程度相关分析

李 明，赖金川，郑 伟，谭 刚，杨秀云，赵小渝，程 标

(1.四川省医学科学院·四川省人民医院东院心内科，四川 成都 610101；2.四川省医学科学院·四川省人民医院老年心血管内科，四川 成都 610072)

冠心病是严重危害生命健康的疾病之一，其冠脉病变程度影响着患者预后。对于老年冠心病患者，往往动脉粥样硬化程度重，累及多支冠脉血管，且冠脉狭窄程度也相对较重，预后也较差。内皮祖细胞(endothelial progenitor cells，EPCs)是一种能分化为血管内皮细胞的前体细胞，有研究发现[1，2]血液中的EPCs具有参与内皮组织修复和血管新生的能力，并且有助于损伤血管的再内皮化进程。本研究以CD34+作为EPCs表面标志，来探讨老年冠心病患者冠脉病变程度与CD34+水平相关性及其临床意义。

1 资料与方法

1.1一般资料选择2015年4～11月在四川省人民医院心内科就诊并行冠脉造影的老年患者127例，年龄61～72岁[(66.4±3.3)岁]。依据冠脉造影结果，分为冠心病组91例和正常对照组36例。冠心病诊断标准为：冠脉造影至少一支冠状动脉或其主要分支狭窄程度≥50%。其中冠心病组男57例，女34例，年龄(66.39±3.71)岁；正常对照组男19例，女17例，年龄(65.58±2.95)岁。排除标准：严重肝肾疾病、器质性心脏病、感染性疾病、严重外周血管疾病、结缔组织疾病、肿瘤、贫血以及2周内服用激素药物者。

1.2方法

1.2.1冠状动脉病变不同类型及结合 SYNTAX 积分、Gensini积分分组：①根据冠状动脉造影结果按ACC/AHA冠状动脉病变形态划分标准分为A、B、C三种病变类型[3]。②采用SYNTAX 积分系统将冠状动脉病变划分为三组，总分83分，0～22分为低危组，23～33分为中危组，≥33分为高危组[4]。③根据冠状动脉造影结果计算冠状动脉病变Gensini积分：每支血管狭窄≤25%为1分，25%～49%为2分，50%～74%为4分，75%～89%为8分，90%～99%为16分，100%为32分。不同节段冠状动脉评分系数：前降支第1、2对角支、右冠近、中、远段及后降支、左室后支各记1.0分，前降支近段记2.5分，中段记1.5分，远段记1.0分，左主干记5.0分，回旋支开口记3.5分，回旋支近段记2.5分。将各段系数乘以与之相对应的狭窄程度记分，再将各狭窄段总积分相加，最终得到冠状动脉Gensini总积分，Gensini积分越高，冠状动脉病变越重[5]。

1.2.2观察指标 所有患者清晨空腹检测总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、血尿酸(UA)等生化指标，采用贝克曼公司生产S600型全自动生化分析仪进行检测。

1.2.3CD34+检测 冠状动脉造影时取外周血约2 ml在4 h内送我院中心实验室，由不知晓造影结果的同一名技师负责CD34+标本检测。流式细胞仪(CYTOMICS FC500)由BECTON DICKINSON公司生产。①吸取CD34单克隆抗体5 μl加入加样管底部。②吸取EDTA抗凝管中全血25 μl加入加样管底部与CD34单抗混匀。③加样管放入“电热恒温培养箱”25 ℃下孵育20分钟。④吸取溶血剂A液300 μl/B液133 μl加入加样管中与全血混匀，以溶解全血中的红细胞，常温下放置5分钟后上流式细胞仪检测。⑤流式细胞仪自动计数、分析10000个细胞，之后自动计算出CD34+所占百分率。

1.3统计学方法采用SPSS 16.0统计软件进行分析。计量资料以均数±标准差表示，两组间比较先进行正态分布检验，若服从正态分布采用t检验，若不服从正态分布采用非参数检验；多组间比较采用单因素方差分析；计数资料采用χ2检验；相关性分析采用Pearson相关分析。以P< 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1冠心病组和对照组临床资料及CD34+水平比较冠心病组和对照组在性别、年龄、吸烟史、高血压史、TC、TG、HDL-C、UA之间比较差异无统计学意义(P> 0.05)；冠心病组血清LDL-C水平高于对照组(P< 0.05)，CD34+百分率低于对照组，差异有统计学意义(P< 0.05)，见表1。

表1 冠心病组与对照组临床资料及CD34+水平比较

2.2不同冠状动脉病变分型组间CD34+比较CD34+百分率在C型病变组低于A型病变组，两组间比较差异有统计学意义(P< 0.05)；C型病变组和B型病变组、A型病变组和B型病变组之间比较差异无统计学意义(P> 0.05)，见表2。

2.3不同SYNTAX积分组间CD34+比较在SYNTAX积分中，高危组CD34+百分率低于低危组，差异有统计学意义(P< 0.05)；而中危组与低危组、高危组与中危组之间比较差异无统计学意义(P> 0.05)，见表2。

2.4不同冠状动脉Gensini积分组间CD34+比较在Gensini积分分组中，高分组CD34+百分率低于低分组，差异有统计学意义(P< 0.05)；而中分组与低分组、高分组与中分组比较差异无统计学意义(P> 0.05)，见表2。

表2 CD34+在A、B、C型冠脉病变分型、SYNTAX积分及Gensini积分各组间比较

2.5冠心病患者Gensini积分与CD34+相关性分析冠心病患者血清CD34+百分率与冠脉Gensini积分呈负相关(r=-0.378，P< 0.01)。

3 讨论

冠状动脉粥样硬化目前认为是冠心病发生、发展的重要因素，而内皮功能障碍则是动脉粥样硬化的起始和关键环节[6～8]。外周血CD34+细胞作为EPCs的表面标志是一群具有游走特性，并且能增殖、分化的幼稚内皮细胞，可归巢于血管损伤或血管新生部位，并在该区域增殖、分化为内皮细胞，当血管内皮损伤后各种趋化因素促使外周血CD34+细胞动员、迁移到受损血管部位，参与血管内皮损伤后的修复、再生及血管新生[6，9，10]。文献报道在冠心病患者中EPCs数量、功能皆明显下降[11，12]，也有研究报道随着年龄增加动脉粥样硬化程度加重，EPCs数量、功能也进一步降低[13]。本研究发现在老年冠心病患者中CD34+百分率较正常对照组明显降低，考虑与年龄增加EPCs生成减少及冠心病多种危险因素持续损伤血管内皮并削弱EPCs功能从而导致外周血EPCs数量进一步减少，而EPCs数量减少及功能障碍则影响了血管内皮修复及血管新生，从而加重了冠状动脉病变。本研究同时结合ACC/AHA冠状动脉病变A、B、C形态分型、SYNTAX评分、Gensini 积分来比较分析各组冠心病患者CD34+水平，发现随着冠状动脉病变狭窄程度加重、累及冠状动脉支数增多，CD34+水平下降更为显著，并且通过相关分析发现CD34+百分率水平与Gensini 积分呈负相关。由此提示EPCs数量减少以及功能降低与冠心病的发病以及冠状动脉病变狭窄严重程度、累及冠状动脉支数具有一定相关性，而检测外周血CD34+百分率水平在一定程度上可作为预判断冠状动脉病变程度的一种新的检测指标。

综上所述，在老年冠心病患者冠状动脉病变严重程度评估中，检测外周血CD34+百分率水平可在一定程度上反映冠状动脉病变狭窄严重程度。但由于本研究入选样本例数较少，需要更大样本量加以证实。