婴幼儿乳粉和保健食品中肉碱对映体的拆分及HPLC测定

斯菲菲 朱丹丹 黄渭

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L-肉碱与D-肉碱是两种形式不同的肉碱立体对映异构体，前者具有良好的生物活性，后者则能抑制线粒体内的能量形成及脂肪酸氧化，并引起心肌和骨骼肌中的L-肉碱功能性损耗，从而易导致人体出现肌肉无力和心律失常等，并且，其还会降低人体的运动耐力，可见，D-肉碱对人体的生化过程会产生较多的毒副作用，基于此，就有必要对婴幼儿乳粉和保健食品中肉碱对映体进行测定，才能促进其更好的生长发育，免受D-肉碱的侵害[1]。

1 实验仪器及方法

1.1 实验仪器及试剂

实验仪器：安捷伦1260荧光检测器、安捷伦1260高效液相色谱仪、紫外检测器、恒温水浴箱、电子天平(精确度为万分之一)、超声脱气机、电子天平、0.45μm微孔滤膜、移液枪。实验试剂：D-肉碱内盐、L-肉碱标准品、三乙胺、磷酸、乙腈、碳酸氢钠、无水碳酸钠、盐酸、1-(9-芴基)-氯甲酸乙酯、四氢呋喃、甲醇、无水乙醇。

1.2 方法

乳粉测定方法：将15g奶粉样品置入30mL去离子水中溶解，并放入50°C水中进行15分钟水浴，再用超声波处理10分钟，将获取的样品试剂与0.1mol/L盐酸溶液混合均匀，静置10分钟后用自然滤纸过滤，用去离子水洗涤滤渣，然后，用1mol/L碳酸氢钠溶液进行调节，至PH为6左右。完成上述样品预处理后，用10mL容量瓶取60μL样品溶液，并加入30μL碳酸缓冲液及1-（9-芴基）-氯甲酸乙酯试剂，再将容量瓶塞塞上并缓慢旋转，然后，将容量瓶放置在45°水浴中浸泡1小时取出，待样品溶液冷却至室温后，用去离子水将此溶液定容至10mL，再用0.45μm微孔滤膜加压过滤，最后对制备的样品溶液进行HPLC紫外检测。……