植物内源RNAi抑制CRISPR编辑效率

2019-01-04 15:01
蔬菜 2019年5期
关键词:深圳大学内源突变体

2019年3月14日,深圳大学莫蓓莘教授研究组以拟南芥为模式植物,系统评估了内源RNAi对不同启动子驱动的Cas9系统编辑效率的影响。研究结果显示,组成型表达的强启动子,如35S CaMV启动子驱动的Cas9表达,受内源RNAi的影响较大,而胚特异性表达的启动子,如EC1.2启动子驱动的Cas9表达,则不受内源RNAi的影响。在拟南芥RNAi突变体rdr6、dcl2、dcl3、dcl4背景下,35S-Cas9系统的基因编辑效率较野生型(WT)背景下有显著提高;基于此,利用人工miRNA(amiRNA)抑制拟南芥内源RNAi通路关键基因RDR6,将amiR-RDR6与Cas9元件构建在一起,可以有效提高35S-Cas9系统的基因编辑效率;同时,利用amiR-RDR6的发育表型,可有效地筛选不含Cas9 T-DNA插入的纯合突变体。该研究为CRISPR/Cas9介导的农作物基因编辑技术的改良提供了新思路。

相关研究结果在线发表在《Science China Life Science》上。

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