中药饮片对多重抗生素耐药细菌的抑菌作用

程 程

（辽阳市中心医院中药局，辽宁 辽阳 111000）

全球范围内抗生素滥用的情况越来越严重，我国属于抗生素应用率最高的国家。滥用抗菌药物导致的必然结果为细菌耐药，最近几年，多重耐药或泛耐药菌感染十分常见，检出率也呈上升的发展趋势[1]。对于普通细菌感染来说，多重耐药菌感染的死亡风险显著提高，占普通感染的2～3倍。中医药对感染性疾病的诊断与治疗经验比较丰富，多数中药被证实存在抑菌药理学效果[2]。中医学注重整体性，重视人和自然之间的相互关系，中药有多种成分、多种途径以及多个环节等特点，能够在总体上使机体免疫能力显著增强，可使多重耐药菌的发病风险有效降低。中药属于抗感染新药筛选与研发的重要来源[3-4]。本研究探究了中药饮片对多重抗生素耐药细菌的抑菌作用，报道如下。

1 资料与方法

1.1 药材与药品：左氧氟沙星、阿奇霉素、头孢噻肟钠、硫酸庆大霉素生产厂家分别为山东鲁抗制药、西安利君制药、齐鲁制药、山东鲁抗制药，全部重要都由本院药剂科提供。

1.2 试验菌种：①大肠杆菌ATCC25922属于标准敏感菌种，在实验室保存；②大肠杆菌S属于临床分离的敏感菌种；③大肠杆菌R属于临床分离的耐药菌种，对头孢吡肟、丁胺卡那以及庆大霉素等多种抗生素存在耐药性。

1.3 培养基：MH培养基或营养琼脂，来自南京一基生化科技有限公司。

1.4 中药饮片水煎液制备方法：利用传统方法煎煮中药饮片，把适量的饮片在砂锅中放置，添加水倒入高处药材40 mm左右，浸泡半小时后，用中火煎煮半小时，倒出药液，过滤处理，选取滤液，在4 ℃的冰箱内保存，用于备用。

1.5 中药平板制作方法：制作含中药的MH培养基，分为为400、200、100、50、25、12、5、6.25、3.125 mg/mL，于高温下湿热灭菌处理30 min左右，倾入平板，制备成含有中药梯度的平板。

1.6 最低抑菌浓度的测定方法：吸收10 μL新鲜的菌悬液点种在不同中药平板上，在37 ℃下培养1 d，对不同菌种的生长趋势密切观察，对最低抑菌浓度予以计算。抗生素最低抑菌浓度根据《微生物学试验指导》中的稀释法予以计算。

2 结 果

2.1 菌种对抗生素敏感度分析：一方面，临床分离菌种对抗生素的敏感度。借助药敏纸片法测定抗生素的耐受性，结果说明临床分离耐药性大肠杆菌属于多种耐药菌种；另一方面，大肠杆菌的标准敏感菌种与临床分离大肠杆菌敏感菌种对抗生素敏感度的对比分析，结果显示：大肠杆菌ATCC25922对庆大霉素、头孢噻肟钠、阿奇霉素、左氧氟沙星的最低抑菌浓度分别为0.1、0.20、1.2、0.2 μg/mL；大肠杆菌S对庆大霉素、头孢噻肟钠、阿奇霉素、左氧氟沙星的最低抑菌浓度分别为0.1、0.12、1.2、0.12 μg/mL；大肠杆菌R对庆大霉素、头孢噻肟钠、阿奇霉素、左氧氟沙星的最低抑菌浓度分别为超过6.3 μg/mL、超过16.5 μg/mL、超过19.5 μg/mL、超过15.5 μg/mL。临床分离的敏感菌种与标准的敏感菌种对抗生素的敏感度一致，没有显著性差异。说明临床分离的耐药菌与敏感菌在后续的中药试验中都可适用。

2.2 中药对耐药菌与敏感菌的最低抑菌浓度：分析常见的8种中药材对临床分离的耐药菌与敏感菌的最低抑菌浓度，如下：①鱼腥草对大肠杆菌S的Exp.1与Exp.2最低抑菌浓度分别为450、450 mg/mL；大肠杆菌R的Exp.1与Exp.2最低抑菌浓度分别为450、450 mg/mL；②桑白皮对大肠杆菌S的Exp.1与Exp.2最低抑菌浓度分别为450、450 mg/mL；大肠杆菌R的Exp.1与Exp.2最低抑菌浓度分别为225、225 mg/mL；③枇杷叶对大肠杆菌S的Exp.1与Exp.2最低抑菌浓度分别为450、450 mg/mL；大肠杆菌R的Exp.1与Exp.2最低抑菌浓度分别为450、450 mg/mL；④柴胡对大肠杆菌S的Exp.1与Exp.2最低抑菌浓度分别为450、450 mg/mL；大肠杆菌R的Exp.1与Exp.2最低抑菌浓度分别为225、225 mg/mL；⑤决明子对大肠杆菌S的Exp.1与Exp.2最低抑菌浓度分别为225、120 mg/mL；大肠杆菌R的Exp.1与Exp.2最低抑菌浓度分别为32、32 mg/mL；⑥连翘对大肠杆菌S的Exp.1与Exp.2最低抑菌浓度分别为225、225 mg/mL；大肠杆菌R的Exp.1与Exp.2最低抑菌浓度分别为155、155 mg/mL；⑦黄芩对大肠杆菌S的Exp.1与Exp.2最低抑菌浓度分别为15、32 mg/mL；大肠杆菌R的Exp.1与Exp.2最低抑菌浓度分别为15、32 mg/mL；⑧甘草对大肠杆菌S的Exp.1与Exp.2最低抑菌浓度分别为250、250 mg/mL；大肠杆菌R的Exp.1与Exp.2最低抑菌浓度分别为60、60 mg/mL。

3 讨 论

按照相关文献显示：中药对临床分离的敏感菌与标准敏感菌的最低抑菌浓度有一定程度不同[5]。所以，本研究对分离的敏感菌与耐药菌一同进行试验，说明力更强。并且此次研究在试验前与试验后检测了实验菌种的敏感度以及耐药性情况，结果说明试验菌种都满足要求，说明所用菌种可在中药抑菌试验中应用，所得结果具有较高的可信度[6-7]。

研究显示：临床分离的敏感菌种与标准的敏感菌种对抗生素的敏感度一致，差异性不显著；临床分离的耐药菌与敏感菌在后续的中药试验中都可适用；大部分中药对敏感菌与耐药菌的抑菌作用没有显著差异，其中，仅有决明子、甘草以及连翘的抑菌差异显著，且与敏感菌相比，耐药菌对重要的敏感度更强。

总而言之，仅有部分中药对敏感菌与耐药菌的抑菌效果存在差异，且耐药菌比敏感菌对中药的敏感度更高，说明中药对细菌感染疾病的治疗更具优势，尤其是抗生素治疗不成功时，中药治疗的临床价值更显著。