E-cadherin和Laminin水平对葡萄胎患者清宫术后转化为侵蚀性葡萄胎的预测价值

李慧，曾俊，周平

(广东省妇幼保健院产科，广州 510010)

侵蚀性葡萄胎是一种恶性滋养细胞肿瘤，由葡萄糖组织侵入子宫肌层或转移至子宫以外的部位所致[1-2]。病理上侵蚀性葡萄胎的葡萄组织可见水样的绒毛及增生的滋养细胞侵入子宫肌层甚至穿透子宫壁，进而伸展进入血管或腹腔[3]。葡萄胎作为临床上常见的妊娠滋养细胞疾病，清宫治疗后有转化为侵蚀性葡萄胎的风险，后者危害程度高，因此早期诊断与治疗有着重要的意义。以往研究表明，上皮型钙粘蛋白(E-cadherin)和层粘连蛋白(Laminin)异常表达与肿瘤细胞增殖、侵袭、转移、分化密切相关[4-6]。虽然目前已有E-cadherin、Laminin与侵蚀性葡萄胎的相关报道[4，7]，但是多关注于E-cadherin、Laminin对不同类型葡萄胎的诊断价值，而关于两者对葡萄胎患者清宫术后转变为侵蚀性葡萄胎的预测价值关注较少。基于此，本研究通过回顾性检测葡萄胎组织E-cadherin和Laminin表达水平，探讨其作为葡萄胎患者清宫术后预后评估的可行性。

一、资料与方法

1.研究对象：选取2016年3月至2017年12月在我院妇科就诊的43例葡萄胎患者作为研究对象，所有患者经临床病史、症状体征及病理检查后确诊，所有患者均行葡萄胎清宫术。

当Y 0,x1=0,x2=1是两个稳定状态，则x1=0是演化稳定策略，开发商建设普通建筑的概率为0，开发商选择建设被动房，表明政府激励对策成效良好，政府与开发商进行了良好合作，最后趋于帕累托优均衡。

纳入标准：经过临床病理检查确诊为葡萄胎；患者临床资料完整；有足够样本组织供免疫组织化学染色检测。

综上所述，国内尿素走势并不如意，开工率下滑利好不断被业内炒作，或已透支；所谓的印度招标利好也不及预期。不可否认，当前行业低开工局面确实给低库存或零库存的尿素企业提供了挺价筹码，但内需疲软，暂时不允许工厂去考虑“货紧价扬”。换而言之，或许淡储期间的供应量不及往年水平，下游经销商库存量偏低，但并不能改变此时下游对高价尿素的不认可。当然，不排除众多经销商在本轮尿素跌价期间等待新的抄底机会，但相应心理价位仍需进一步博弈。预计11月底，国内尿素主产区报价2000元/吨左右。

4.侵蚀性葡萄胎诊断标准：参考2004年国际妇产科联盟(FIGO)的诊断标准[10]，葡萄胎清宫术后，在排除再次妊娠和葡萄胎残留的情况下，随访时间内满足以下1项并且排除妊娠的即可判断为侵蚀性葡萄胎：(1)葡萄胎排空后β-HCG检测4次呈平台状态(±10%)，并持续3周及以上；(2)葡萄胎排空后β-HCG测定值3次升高(>10%)，并持续2周及以上；(3)葡萄胎排空后β-HCG水平持续异常6个月及以上；(4)病理学检查明确诊断者。

对所有43例患者进行随访，随访方式包括门诊复查和电话随访，本研究随访截至2018年6月。本研究中所涉及到对患者的处理，均在告知患者的情况下进行，研究设计获得了本院伦理委员会的批准。相关检验结果与患者的个人信息均严格保密，符合伦理学标准。

侵蚀性葡萄胎继发于葡萄胎妊娠后，是一种胎盘绒毛滋养细胞疾病。侵蚀性葡萄胎危害性强，容易造成血道转移，因此早期诊断与及时治疗十分关键。而E-cadherin与Laminin是与肿瘤相关的增殖、迁移、分化的成分，以往研究表明在侵蚀性葡萄胎的发病与侵袭中发挥着重要作用[11]；但是既往研究的侧重点主要是观察E-cadherin和Laminin对不同类型葡萄胎的诊断价值[4，7]，关于葡萄胎预后的相关研究少见报道。

4.葡萄胎患者的预后分析：将患者随访期间内的预后结局(0=未转化，1=转化)纳入Cox回归模型进行分析，结果显示，年龄增长、停经时间越长、葡萄胎清宫次数≥2次、血β-HCG升高时间≥60 d、E-cadherin和Laminin表达阴性是葡萄胎患者转化为侵蚀性葡萄胎的危险因素(P<0.05)(表2)。

3.一般资料收集：对参与本研究的所有患者收集其基本人口学信息、临床病史、实验室检测指标，并在其出院后进行电话随访预后状况。

排除标准：伴有急性或慢性的感染患者；患有其他恶性肿瘤的患者；合并自身免疫性疾病。

2.葡萄胎组织中E-cadherin和Laminin表达水平：E-cadherin和Laminin蛋白主要表达于细胞浆。葡萄胎组织中E-cadherin表达阳性率为46.5%(20/43)，Laminin表达阳性率为37.2%(16/43)；其中，随访期间转化为侵蚀性葡萄胎者其葡萄胎组织中两种因子的表达阳性率均为0(0/7)。

二、结果

本研究随访截止日期2018年6月1日，随访时间6～18个月，43例患者均获得随访；随访期间共计发生7例转化为侵袭性葡萄胎，转化率16.3%。

1.患者一般情况：本研究共纳入43例女性葡萄胎患者，年龄18～45岁，平均年龄(29.3±4.9)岁。43例患者均未绝经，月经初潮11～17岁，平均初潮年龄(12.5±2.1)岁，此前无妊娠滋养细胞疾病史。经产妇20人，首次妊娠23人。停经时间6～18周，其中>12周者9例，8～12周者23例，6～8周11例。葡萄胎清宫次数1次者28人，≥2次者15人。

3.转化组和未转化组比较：单因素分析显示，与未转化组比较，转化组年龄增加、停经时间延长、葡萄胎清宫次数增加、血游离β-HCG升高时间延长、E-cadherin和Laminin表达阴性率增高(表1)。

本科院校图书馆的招聘信息占抓取到的招聘信息总数的39．1%，是人才需求最旺盛的图书馆类型。本调查将本科院校图书馆划分为两个部分，一是包括独立学院在内的普通高校图书馆；二是高水平大学图书馆，即原来的“211”院校。普通高校图书馆的招聘信息有148条，占招聘信息总数的29．4%，招聘198人；高水平大学图书馆的招聘信息有49条，占招聘信息总数的9．7%，招聘 60人。

2.免疫组织化学染色：(1)样本采集：采集葡萄胎患者的葡萄胎组织，经石蜡包埋分装，之后送往实验室进行病理检查。(2)检测：检测组织E-cadherin和Laminin表达水平。石蜡包埋的样本组织经二甲苯脱蜡，梯度乙醇水化；加入柠檬酸盐缓冲液(pH=6.0)加热30 min修复抗原，3%H2O2孵育10 min消除内源性过氧化物酶，加入5%山羊血清封闭2 h。样本组织加入兔抗人E-cadherin抗体(武汉博士德生物)1：200和兔抗人Laminin抗体(Sigma，美国)1：500，4℃孵育过夜，次日再加入二抗孵育1 h，光学显微镜下观察染色结果。(3)结果判定：按照染色强度和阳性细胞染色面积对E-cadherin和Laminin表达进行综合评价。染色强度：最终评分为染色强度评分(阴性0分；弱染色1分；中等染色2分；强染色3分)×染色面积(0～5%为0分；6%～25%为1分；26%～50%为2分；>50%为3分)。参考相关报道的评价标准[8-9]，最终评分≥3分为阳性表达，<3分为阴性表达。

表2 葡萄胎患者预后的Cox回归分析

三、讨论

澳克泰工具技术有限公司推出的全新AFM45-XN07/XN09面铣刀系列产品，刀盘设计采用45°主偏角设计，可以达到最佳的受力平衡和完美的高效铣削能力。该系列面铣刀刀片采用双面负型七边形设计，拥有14个有效切削刃，具有极佳的加工经济性。

Varras等[12]研究结果提示E-cadherin与子宫内膜分化与预后相关。E-cadherin是机械粘接细胞收缩的皮层，作用于生物力学反馈途径，是协同细胞间粘接的糖蛋白，通过介导粘结这一通路进而发挥作用[6]。本研究发现，E-cadherin在转化组病例葡萄胎组织中表达较弱。可能的原因是葡萄胎后期的增殖分化程度增高，E-cadherin表达下降从而使得细胞间的粘接作用降低，某种程度上为滋养细胞的侵袭提供了可能性，从而使滋养细胞侵袭作用增加，进而脱落、转移甚至迁移至其他部位，加重疾病程度。本研究结果表明，早期检测E-cadherin表达水平对葡萄胎患者清宫术后转化为侵蚀性葡萄胎有较大的预测价值。

Laminin介导细胞粘附、迁移、增殖分化的组成成分。本研究提示Laminin表达降低可使葡萄胎患者清宫术后转化为侵蚀性葡萄胎的风险增加，其免疫组织化学表达或可评估肿瘤细胞的分化与侵袭性[13]。Laminin作为一种重要的基底膜糖蛋白，在滋养细胞活动过程中介导其粘连，而当其表达降低，滋养细胞稳定性下降从而其游离迁移至其他部位。Laminin表达在侵蚀性葡萄胎发展及侵袭过程中发挥一定作用，与葡萄胎增殖分化改变程度相关。

E-cadherin与Laminin是肿瘤发生/发展过程中的两个相对比较敏感的指标因素，本研究采用Cox回归分析法求证这两个指标对葡萄胎患者清宫术后转化为侵蚀性葡萄胎的影响。结果表明，低水平的E-cadherin与Laminin是良性葡萄胎转化为侵蚀性葡萄胎的独立危险因素。建议临床医生在临床治疗过程中密切关注E-cadherin与Laminin水平低的患者，特别是E-cadherin、Laminin双阴性患者，建议持续监测患者血游离β-HCG水平变化情况，对其及时进行药物治疗及其他辅助措施以降低其转化为侵蚀性葡萄胎的可能性。

在进行检测的过程中，应用物化探技术勘测矿物质的地质效果，应当结合相应矿产来有效检查地质效果，合理、科学的评估物化探技术的实际操作手段，这样才能为之后技术的合理应用奠定坚实的基础。在目前的地质环境当中，大多数矿物质通过以往的勘测手段往往很难进行监测，并且在对这一技术进行使用的过程中，需要结合地质结构的实际状况，这样才能得出合理的数据信息，并且结合这些数据信息来对勘测方案进行规划。对多样化的矿产勘查手段进行充分的应用，能够深入的分析矿产区域的矿物质特性、交通情况、地质状况等，这样才能物化探技术在矿产勘查工作当中得到有效的运用，从而实现最大化的地质效果。

侵蚀性葡萄胎的临床治疗以化疗为主，辅助以手术治疗。因其疾病危害程度对女性较大，为此康复护理治疗、以及心理治疗研究表明具有很重要的作用[1，2，14-16]，本研究仅从医学病理角度考虑相关指标对于病情转化的预测价值，而对后期护理及心理咨询等未考虑，其结果具有一定的局限性。但本研究仍是结合病理与疾病预后的调查，对疾病的认识有一定的价值，对预测疾病预后加强完善其后期康复有重要意义。