STAGO全自动血凝分析系统的性能验证

张俊国 郑秀娥 李晋

1 山东省立医院 （山东 济南 250021）

2 山东省食品药品监督管理局审评认证中心 （山东 济南 250014）

3 山东省疾病预防控制中心 （山东 济南 250014）

内容提要： 目的：对STAGO全自动血凝分析系统进行性能验证。方法：对STAGO全自动血凝分析仪的精密度、线性范围和携带污染率进行验证。结果：STAGO全自动血凝分析系统PT、APTT、TT和Fib 4个项目的精密度验证均合格；Fib在测定范围内都表现出较好的线性关系（斜率0.97～1.03，r≥0.95）；APTT携带污染率验证合格。结论：STAGO全自动血凝分析系统的精密度、线性和携带污染率这三个方面基本满足临床生化检测的实验要求。

Stago全自动血凝分析仪为法国STAGO公司的产品，是目前较为先进的全自动血凝分析仪，它具有的凝固法，底物发色法，免疫比浊法三种不同检测系统，通过8个通道采用不同检测原理，同时对多项实验指标进行检测。根据美国临床实验室改进法案（CLIA’88）对临床实验室质量管理和实验室认可的要求，不同医学检验部门必须对所使用的检测系统进行性能评价，因此参考美国临床实验室标准划研究所（NCCLS）系列文件，结合实验室实际情况，对Stago全自动血凝分析仪的精密度、线性范围、携带污染率进行了验证实验。

1.材料与方法

1.1 一般材料

样品来源：本院就诊患者或正常体检者无溶血、无黄疸、无脂血的新鲜血浆。

仪器：Stago全自动血凝分析仪。

试剂、标准品、质控品：均为Stago全自动血凝分析仪配套产品。

1.2 方法

1.2.1 精密度评价

根据EP5-A2[1]的文件进行实验前质量控制，根据EP15-A2[2]的文件进行操作和计算。取低值及高值血浆，3次/d，连续测定5d，2次之间的时间间隔不少于2h。将测量数据录入精密度验证表格，自动计算批内精密度CV%和批间精密度CV%，均数、标准差、和变异系数百分比、实验室总误差等。数据分析与结果判断：批内和批间试验的精密度CV%均应小于该项目方法学或医学上的最大允许CV%。一般应该满足仪器厂家说明书上仪器性能的精密度要求，如果不能满足，按以下情况来作为判断标准：①如果CLIA’88上有相应项目的可接受范围（TEa），则批内试验的CV%≤1/4TEa，批间试验的CV%≤1/3TEa；②如果CLIA’88或其他资料上没有具体的要求，则按照室间质评相应项目的可接受范围（TEa），批内试验的CV%≤1/4TEa，批间试验的CV%≤1/3TEa；③如果上述条件均不满足，则该项目的最大允许CV%由技术主管根据实验室情况而定。

1.2.2 线性范围评价

根据EP6-A[3]文件进行操作和计算。选取一份接近预期上限（H）和一份接近预期下限（L）的混合血浆测定3次后取均值定为预期值，并按5L、4L+1H、3L+2H、2L+3H、1L+4H、5H的关系各自配制混合血浆，形成系列评价样品。每个稀释度由高到低、由低到高、再由高到底重复测定3次，再由高到低重复测定3次，计算均值。将6对实测值（Y轴）与预期值（X轴）进行直线回归，计算y=ax+b，验证线性范围。以a值在0.97～1.03、r≥0.95为判定标准。

1.2.3 携带污染率评价

根据ICSH的《血细胞分析仪评价指南》[4]。选取一份高浓度标本（H），以及一份低浓度的标本（L），按国际血液学标准化委员会制定的程序，将高值样本连续测定3次（H1、H2、H3），紧接着连续测定低值样本3次（L1、L2、L3），携带污染率结果为[（L1～L3）/（H3-L3）]×100%。结果＜2%为合格。

2.结果

2.1 精密度实验验证结果

PT低值批内精密度大于厂家声明的批内精密度，但小于CLIA’881/4CV，批间精密度小于厂家声明的批间精密度；PT高值批内精密度大于厂家声明的批内精密度，但小于CLIA’881/4CV，批间精密度小于厂家声明的批间精密度。APTT低值批内精密度大于厂家声明的批内精密度，但小于CLIA’881/4CV，批间精密度大于厂家声明的批间精密度，但小于CLIA’881/3CV；APTT高值批内精密度大于厂家声明的批内精密，但小于CLIA’881/4CV，批间精密度大于厂家声明的批间精密度，但小于实验室CLIA’881/3CV。TT低值批内精密度小于厂家声明的批内精密度，批间精密度小于厂家声明的批间精密度；TT高值批内精密度大于厂家声明的批内精密度，但小于实验室CLIA’881/4CV，批间精密度小于厂家声明的批间精密度。Fib低值批内精密度小于厂家声明的批内精密度，批间精密度小于厂家声明的批间精密度；Fib高值批内精密度小于厂家声明的批内精密度，批间精密度大于厂家声明的批间精密度，但小于实验室CLIA’881/3CV（见表1）。结果表明Stago精密度实验验证合格。

表1. 精密度验证结果

表2. APTT携带污染率验证结果

图1. Fib线性范围验证结果

2.2 线性范围验证结果

本实验室通过验证Fib项目的线性来评价Stago血凝分析仪的线性范围。使用6种浓度标本进行Fib的检测。将实测值（Y轴）与预期值（X轴）进行直线回归，计算y=ax+b。Fib的检测值均符合a值在0.97～1.03范围内、r≥0.95的判定标准（见图1）。

2.3 携带污染率验证结果

本实验通过验证APTT携带污染率来评价Stago血凝分析仪携带污染率。APTT携带污染率是0.2%，＜2.0%（见表2），根据此原则判断STAGO分析仪进行项目检测时，结果完全不会受其他标本的干扰，携带污染试验合格。

3.讨论

Stago全自动血凝分析系统用于凝血、抗凝、纤维蛋白溶解系统功能的检测，为出血性和血栓性疾病的诊断与鉴别诊断、溶栓及抗凝治疗的监测与疗效观察提供有价值的指标。Stago采用了磁珠凝固法，有效避免了溶血、黄疸、脂血等在检测中的影响，在全国大医院中得到广泛的应用，本实验室于2009年引进该仪器，现根据15189实验室认可的要求，对仪器的精密度、线性范围、携带污染率这三个方面进行验证。

精密度是医学检验中保证测定结果准确可靠的重要指标，它代表随机误差的大小，是对同一标本进行多次重复侧定时测定值的一致程度，是进行其他方法学验证实验的前提。本次评价使用低值和高值两个浓度新鲜血浆，每天两个浓度各分析1批次，批次中重复测定3次，连续测定5d。测量结果表明Stago全自动血凝分析系统精密度实验证合格，仪器重复性好，均能满足临床要求，可以进行后续的验证实验。

线性范围验证是观察一种检测方法或一个检测系统的检测范围[5]。通过该实验室可以了解其最高值（上限）和最低检测值（下限），是对患者检测结果可报告范围的一种评价，也有助于评价偏倚的大小。对Stago全自动血凝分析系统PT、APTT、TT、Fib线性范围验证均合格，说明Stago测量各项目呈较好的线性关系。

携带污染率是仪器性能验证不可缺少的一部分，APTT的携带污染率实验验证合格，因此判断Stago全自动血凝分析仪进行项目检测时，结果完全不会受其他标本的干扰。

综上所述，Stago全自动血凝分析系统的精密度、线性范围、携带污染率等主要性能均能达到临床实验室要求，能满足临床对出血性和血栓性疾病的诊断与鉴别诊断、溶栓及抗凝治疗的监测与疗效观察的要求。同时，本实验为全自动血凝分析仪性能验证提供一套较准确的方案。