探讨钙敏感受体及紧密连接蛋白-14在大鼠肾草酸钙结石形成中的作用

李朋，高存祥，王勤章，钱成，徐浩，申茂磊，郝志强，傅家豪，钱彪

(1.石河子大学医学院第一附属医院泌尿外科，新疆 石河子 832000 2.解放军69235部队卫生所，新疆 奎屯 833200)

泌尿系结石是泌尿系统最常见的疾病之一，常发部位为肾脏，其发病原因和发病机制目前尚不明确。肾脏部位的结石主要为草酸钙等含钙结石[1-2]，有研究表明，钙的代谢异常是导致含钙尿路结石形成的重要因素之一，高钙尿引起尿液相对过饱和诱发了含钙结石的形成[3]。钙敏感受体(calcium-sensing receptor，CaSR)可通过上调髓袢升支粗段(thick ascending limb，TAL)紧密连接蛋白-14(Claudin-14)的表达，使肾小管TAL钙的重吸收受到抑制，尿钙排泄率增加，进而形成高钙尿诱发了含钙结石的形成[4-5]。据此推测：CaSR及Claudin-14在大鼠肾草酸钙结石的形成过程中扮演着重要的角色。本研究对CaSR及Claudin-14在草酸钙结石形成过程中表达水平的改变进行动态观察，对两者在结石形成中的作用机制进行初步探讨。

1 材料与方法

1.1 材料

SPF级雄性Wistar大鼠60只，6周龄左右，体质量(210±15)g，购自新疆医科大学实验动物中心〔合格证号SCXK(新)2013-0001〕。多功能光学显微镜及图像采集系统(BX40，日本Olympus公司)，CaSR抗体(Abcam公司)、Claudin-14抗体(英国Abcam公司)。

1.2 大鼠肾结石模型的建立及实验分组

参照孙稳等[6]的方法制作大鼠肾结石模型。适应性喂养1周后，按照随机数字表法将60只SPF级雄性Wistar大鼠分为空白对照组与结石组，每组各30只。空白对照组给予正常饮水加每日每只2 mL灌胃两周；结石组给予1%乙二醇饮水和2%氯化铵每日每只2 mL灌胃两周。1～10周，每组每周处死3只大鼠，并取其双侧肾脏为标本。……