余姝侨 官昭瑛 陈红
(深圳技师学院应用生物系,深圳 518116)
多菌灵(Methyl-1H-benzimidazol-2-yl carbamate,MBC)是一种农林业中常用的广谱农药产品,对由真菌引起的病害有防治效果,在我国的使用范围广泛[1]。多菌灵也是多种常用杀菌剂(苯菌灵、甲基噻吩酯等)的有效成分或水解产物[2]。多菌灵为可疑致癌物、致突变物和内分泌干扰物,在环境中较稳定,对哺乳动物有毒害,其残留可引起肝病和染色体畸变,土壤中的多菌灵残留也可进入地下水系统危害水生生物[2-4]。它的使用在很多发达国家被严格控制,但在我国的使用量较大[5]。土壤和水中的多菌灵残留通常经微生物自然降解,如结核分枝杆菌属、诺卡氏菌和红球菌等[6-10]。然而,天然微生物降解效率和底物特异较低。同时,化学杀真菌剂的长期使用会改变土壤中微生物菌群的平衡,影响降解效能[11]。其他的物理或化学降解方法起效较慢,价格昂贵,设施复杂,不利于大规模推广[12]。因此,开发合理的人工微生物降解方法对降低或去除多菌灵残留有重要的意义。
大肠埃希氏菌(Escherichia coli)作为常用的基因工程载体,具有快速繁殖和易于进行靶基因表达调控的优势。选择适合的表达系统对靶基因的调控具有重要意义,如诱导型表达系统可限时表达靶基因,减少过表达引发的多效性效应,并通过规避代谢负担获得产品的最大量产[13-14]。常用的诱导系统通过添加化学诱导剂如异丙基β-D-1硫代氨基吡喃糖苷(IPTG)、脱水四环素(ATC)、阿拉伯糖或调整物理化学因素如pH、温度或紫外光(UV)达到[15-17]。……