超声微泡联合干细胞移植对心肌梗死大鼠心肌微环境的影响及循环Irisin水平的相关性研究

薛静，张周龙，陈胜江

心肌梗死（MI）是目前世界范围内致死及致残的主要原因。研究发现超声靶向破坏微泡（UTMD）已经发展成为用于位点特异性药物和基因递送的新的有前景的工具，其具备优良的毛细血管通透性，能无创性地和选择性地将基因递送至梗塞部位[1-3]。骨髓间充质干细胞（MSCs）具有经血液循环归巢至损伤心肌的能力，但目前缺乏促使干细胞向缺血心肌特异性趋化的有效方法，若单纯的通过干细胞在损伤区的归巢能力来进行治疗，相应的疗效一般不很好[4]。本文主要是对超声破坏微泡联合MSCs移植进行心肌细胞修复的实验研究，探讨其是否可促进心肌梗死大鼠血管新生，并分析VEGF和Irisin的表达情况。

1 材料与方法

1.1 一般材料10只Wistar大鼠（2周龄），体重（25±5）g，用于分离与培养骨髓间充质干细胞，60只成年Wistar健康大鼠，体重（219±21）g，用于心肌梗死模型构建，以上实验动物不限定雌雄，购于河南科技大学实验动物中心。声诺维（Sonovue）超声造影剂，购于意大利博莱科公司。心脏彩超机，型号IE33，荷兰Philips公司。

1.2 实验方法

1.2.1 细胞分离与培养幼龄大鼠取胫骨及股骨的骨髓液，采用密度梯度离心法结合贴壁培养技术来分离、纯化与培养大鼠骨髓MSCs，得到符合心肌梗死移植的种子细胞。

1.2.2 动物模型制作Wistar 大鼠以10%水合氯醛（3 ml/kg）腹腔注射麻醉后, 连接心电监护仪，仰卧位固定于手术台, 颈胸部备皮，行气管插管呼吸机辅助通气，打开胸腔 , 暴露心脏 , 找准左心耳，在与肺动脉圆锥交界处下方约2 mm处结扎左冠状动脉前降支，控制3～5 mm左右的进针深度，观察心电图R波增宽、ST段和J点持续抬高为模型制作成功标志。……