层流洁净手术室空气日常监测的方法和效果

张飞龙，于炜

日照市人民医院设备科 （山东日照 276800）

层流无菌手术室是对患者进行手术治疗的重要场所，定期对手术室的空气菌落数进行测定是监测净化手术室洁净的重要手段。为探讨层流洁净手术室空气日常监测的方法，本研究选取我院百级、千级与万级层流洁净手术室各1间为测试对象，分别采取多点布控法与常规布控法对手术室内不同高度空气采样，并比较样本检测结果。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 测试对象与材料

本研究测试对象为我院百级、千级与万级层流洁净手术室各1间，手术室面积均小于30 m2；测试所使用材料为90 mm营养琼脂平板培养皿。

1.2 采样方法

开启层流空调，待其运转30 min后将室内温度调节为22～25℃，湿度调节为50%～60%，于静态状态下采取空气沉降法行专人采样。

1.2.1 常规布控采样

依据《医药消毒卫生标准》GB／T 15982-1995，进行常规布控方法采样30 min，其中百级与千级层流洁净手术室均于东、西、南、北、中5个方位分别布1个点；万级层流洁净手术室于里、中、外3处分别布1个点。第1轮采样高度为0．8 m高处；第2轮采样高度为1．2 m高处［1］。

1.2.2 多点布控采样

依据《医药卫生洁净室（区）沉降菌的测试方法》GB／T 16294-1996，进行多点布控方法采样30 min，其中百级层流洁净手术室于手术区布5个点，周边区布8个点；千级层流洁净手术室于手术区布3个点，周边区布6个点；万级层流洁净手术室于手术区布3个点，周边区布4个点［2］。第1轮采样高度为手术区0．8 m高处与周边地面；第2轮采样高度为手术区1．2 m高处与周边0．8 m高处。

于同等条件下实施两种采样方法，均连续采样4 d，先行常规布控采样，再行多点布控采样，共采样8 d，并行阴性对照，以检测空气培养皿是否遭到污染。将所采集样本置于37℃环境下行48 h培养，并计算各批样本的菌落数。

1.3 检测指标与计算标准

对样本的平板平均菌落数进行计算，计算公式：平板的平均菌落数＝（M1＋M2＋……＋Mn）／n，其中M1、M2……Mn表示各平板的菌落数；n为所有的平板数量。将计算结果与GB 50333-2002《医院洁净手术部建筑技术规范》中关于不同洁净度平均菌落数标准进行比较，百级、千级与万级层流洁净手术室手术区的平均菌落数量应分别低于0．2 cfu／平板、0．75 cfu／平板与2 cfu／平板；百级、千级与万级层流洁净手术室周边区的平均菌落数量应分别低于0．4 cfu／平板、1．5 cfu／平板与4 cfu／平板［2］。

1.4 统计学处理

2 结果

2.1 不同级别层流洁净手术室采取空气沉降法进行采样的检测结果

不同级别层流洁净手术室的多点布控采样与常规布控采样的平板菌落数均未超标；百级与千级层流洁净手术室的常规布控采样法的平均菌落数量多于多点布控采样法，而万级层流洁净手术室的常规布控采样法的平均菌落数量少于多点布控采样法，差异均有统计学意义（P＜0．05）。见表1。

表1 不同级别层流洁净手术室空气采样检测结果比较（cfu／平板，x±s）

2.2 多点布控采样法不同高度的样本平板阳性率比较

多点布控采样法行空气沉降采样的样本中，手术区0．8 m与1．2 m高处采样数均为48，检测阳性率均为0．00%，未见细菌生长；周边地面与周边0．8 m高处的采样数均为74，周边地面的样本平板阳性率为13．51%（10／74），高于周边0．8 m高处的4．05%（3／74），差异有统计学意义（χ2＝4．672，P＜0．05）。

2.3 常规布控采样法不同高度的样本平板阳性率比较

采取常规布控采样法行空气沉降采样的样本中，0．8 m与1．2 m高处的采样数均为56，0．8 m高处的平板阳性检出率为12．50%（7／56），与1．2 m高处的5．36%（3／56）比较，差异无统计学意义（χ2＝1．102，P＞0．05）。

3 讨论

层流洁净手术室空气的日常监测是医院手术室管理的重要内容，也是保障手术室安全的重要手段。对层流洁净手术室空气的检测，以往多采取百、千级层流洁净手术室进行采样，再计算各方位的平板平均菌落数量，并与相关标准进行比较；对万级层流洁净手术室空气的采样，则会于里、外、中3处布点。此采样方法虽可遍布整个手术室，客观地表现出手术室的空气污染程度，但此采样方法过于片面，其于横向上的采样较为广泛，却忽略了纵向上空气的采样［3］。多点布控采样法则不同，其同时于手术室内的手术区与周边区布点，在进行检测时兼顾不同高度上空气的采样。

本研究结果显示，我院各级别层流洁净手术室的平板菌落数均未超标，表明我院层流洁净手术室的空气良好；百级与千级层流洁净手术室的常规布控采样法的平均菌落数量多于多点布控采样法，而万级层流洁净手术室的常规布控采样法的平均菌落数量少于多点布控采样法，差异有统计学意义（P＜0．05）。同时针对不同的高度，采取多点布控采样法行空气沉降采样的样本中，周边地面的样本平板阳性率高于周边0．8 m高处，差异有统计学意义（P＜0．05），而采取常规布控采样法行空气沉降采样的样本中，0．8 m与1．2 m高处的平板阳性检出率比较，差异无统计学意义（P＞0．05），由此可见，多点布控采样法对手术室内空气菌落的检出精准性优于常规布控采样法。

虽然当前各类杂志、书籍或医院手术室洁净相关标准对空气采样高度的阐述有所不同，但就本研究所选取的采样高度来看，多点布控采样法于手术区0．8 m和1．2 m与周边地面进行采样，其基本与《医院洁净手术部建筑技术规范》GB 50333-2002中的相关高度要求相符［4］。常规布控采样法于0．8 m和1．2 m处采样基本与《医药消毒卫生标准》GB／T 15982-1995中的相关高度要求相符［5］。因采取沉降法实施空气培养，其主要问题在于灵敏度偏低、误差较大。细菌于空气中的分布是不均匀的，在同样的条件下，采集空气所采取的方法不同，样本的平板阳性检出率也会有所不同。但不管平板阳性检出率是高是低，依公式计算出来的平均菌落数都要与国家标准进行比较，以判断空气质量是否超标。所以，建议选择多点布控采样法，采集高度为手术区0．8 m和1．2 m，同时利用空气沉降法对周边地面采样实施监测。若是采取常规采样法，则采样高度宜选择在0．8 m处。

综上所述，采取多点布控采样法于手术区0．8 m和1．2 m的高度进行采样，并行空气沉降法监测周边地面采样是层流洁净手术室空气日常监测的有效方法。