金刚烷胺残留化学发光酶免疫法的建立

崔廷婷,冯才伟,吴小胜,王兆芹,焦 强,李 静,张 颖,万宇平,*

(1.北京勤邦生物技术有限公司,北京 102206;2.北京市食品安全免疫快速检测工程技术研究中心,北京 102206;3.河南省口岸食品检验检测所,河南郑州 450003)

金刚烷胺(Amantadine,AMD)为饱和三环癸烷的氨基衍生物,是一类抗病毒药物[1],也能有效缓解帕金森病患者的症状[2]。但近年来由于流感病毒的大范围流行,很多养殖场开始在畜禽饲养过程中非法使用AMD[3],将人用抗病毒药物移植兽用,这不仅容易导致动物中毒和动物性食品中药物残留,还可导致病毒发生变异,使机体产生免疫抑制和耐药性[4-5],而且还具有神经毒性等一系列的副作用[6]。因此,我国农业部2005年第560号公告明确规定,金刚烷胺和金刚乙胺等抗病毒药物在兽医上禁止使用[7]。

目前,检测金刚烷胺主要采用气相色谱法[8]、液相色谱-质谱联用技术[1,3,9]等仪器方法,以及胶体金免疫层析法[6,10]、酶联免疫吸附法(ELISA)[6,11]等免疫分析方法。其中,仪器分析具有较高的灵敏度和准确度,但前处理复杂,检测成本高,无法满足对大量样本进行快速筛查的需求;免疫方法操作简单,速度快,成本低,在兽药残留分析中具有十分广阔的前景。而化学发光酶免疫分析方法(chemiluminescence enzyme immunoassay,CLEIA)是基于高灵敏性的化学发光反应和高特异性的免疫反应而建立的一种测定方法[12],与ELISA相比,灵敏度更高[13],已广泛应用于生物医药科学和临床化学等方面[14-15],未来将成为兽药残留检测发展的一种趋势。本研究基于抗原抗体特异性反应及磁性微球分离技术,建立金刚烷胺残留的化学发光酶免疫分析方法,以实现动物组织、兽药、饲料中金刚烷胺残留的大规模快速检测。……