一株西藏牦牛源肠球菌的分离鉴定

孔新平，周 磊，王汉鼎，吴庆侠，董海龙

（西藏农牧学院，西藏 林芝 860000）

肠球菌属细菌为G+球菌，常成对或短链，肠球菌属有粪肠球菌、屎肠球菌等19种。作为人和动物肠道的正常菌群，一般情况下肠球菌并不引起疾病，但在人或动物机体抵抗能力不强的情况下，它就会成为条件致病菌引起人或动物机体患病。此外，由于肠球菌的固有耐药性以及因人类对抗生素的滥用获得性耐药性的产生，肠球菌对于抗生素的耐药情况愈发严重[1]。本次试验对从西藏山南地区采集到病死牦牛肝脏上分离到的试验菌株进行细菌分离鉴定耐药性检测，将为西藏自治区细菌耐药性检测以及山南地区牦牛养殖和临床用药提供一定指导。同时，本次试验利用枯草芽孢杆菌替代传统抗生素来治疗粪肠球菌导致的腹泻，将为解决粪肠球菌临床治疗提供新思路。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 病料来源 对西藏山南地区一头病死牦牛进行尸体剖检，无菌采集牦牛肝脏放入密封袋中，置于冰盒后迅速送往试验室，-20℃冰箱保存待检。

1.1.2 主要试剂 营养肉汤、普通琼脂、麦康凯培养基、绵羊血液、生化鉴定管（购自杭州滨河微生物试剂公司）、2×Es Taq MasterMix（Dye）、细菌基因组DNA提取试剂盒、50×TAE、Maker、核酸染料（购自武汉擎科创新生物科技有限公司）。

1.1.3 主要仪器 恒温培养箱、摇床、烘箱、超净工作台、PCR仪、凝胶成像系统、普通光学显微镜、电泳仪。

1.2 试验方法

1.2.1 细菌的分离 将病料充分研磨后离心，采集上清接种于普通营养肉汤，37℃摇床80r/min培养24 h。……