林建华,洪重,周斌
(温州医科大学附属第二医院 肝胆外科,浙江 温州 325027)
肝部分切除术是外科治疗肝癌的重要手段,但大量肝实质切除会导致肝功能衰竭、残肝再生障碍,造成很高的并发症及病死率,严重影响了肝癌的治疗效果。如何促进肝癌患者术后肝再生,缩短康复时间是当前肝胆外科研究的热点和难点问题。本研究用不同亮氨酸浓度的氨基酸配方对肝部分切除术后大鼠进行添加喂养,探讨其对残肝再生能力的影响。
1.1 实验动物及分组雄性SD大鼠18只,温州医科大学实验动物中心提供,体质量250~300 g,实验动物许可证号:SYXK(浙)2015-0009,按Higgins法切除肝左叶和中叶(约占全肝的70%),同时行胃造瘘术。术后随机分为3组,分别经胃造瘘管给予平衡氨基酸(8.5%乐凡命,无锡华瑞制药有限公司BAA组)、支链氨基酸(杭州海力生公司,BCAA组)、亮氨酸(杭州海力生公司,Leu组),每组6 只。每日供给等氨基酸量1 g/kg,自由进食及饮水,喂养7 d后处死动物,收集肝脏标本,处理后备测。3组氨基酸成分差异见表1。

表1 3组氨基酸添加量的比较(/kg体质量)
1.2 方法
1.2.1 残肝/体质量比:记录大鼠每日体质量,7 d后处死,取出残肝,0.9%氯化钠溶液漂洗后称质量,计算残肝/体质量比。
1.2.2 肝细胞增殖细胞核抗原Ki-67和PCNA表达:采用免疫组织化学二步法,检测肝组织标本石蜡切片,计算Ki-67和PCNA阳性肝细胞数。由不参与实验分组的病理科医师在高倍显微镜视野下,计数1 000个肝细胞中阳性染色细胞数,以百分数表示。
1.3 统计学处理方法采用SPSS20.0软件进行统计分析。……