骨折对脓毒症小鼠预后的影响及机制研究

王明煬 湛佳兴 周 琦 刘庆阳 徐凯智

华北理工大学附属唐山工人医院麻醉科 河北唐山 063000；①应急总医院

骨折是重症监护室(ICU)患者死亡的原因之一。患者在首次入住ICU时通常会出现非感染性全身炎症反应[1]。在创伤后炎症反应中存活的患者通常由于细菌重复感染而引起脓毒症[2]。传统上认为骨折可导致脓毒症，然而希腊人发现早期合并多发伤的脓毒症患者的存活率高于无多发伤的患者，并且认为IL-10的释放可能是脓毒症患者预后良好的原因之一[3]。研究表明，调节性树突细胞(CD11c-CD45RBhigh DCs)可以从存在粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、TNF-α和IL-10的骨髓细胞中提取，活化后分泌高水平的IL-10。与正常DC产生促炎性细胞因子不同，CD11c-CD45RBhigh DCs产生较少的促炎细胞因子，且优先产生IL-10[4]。基于上述研究结果，笔者假设，骨折通过激活先天免疫，促进骨髓增殖分化，增加CD11c-CD45RBhigh DCs的数量对脓毒症小鼠起到保护作用。

1 材料与方法

1.1实验材料

1.1.1实验动物 选择6～8周龄的小鼠并且体质量约20g的雄性C57BL / 6小鼠(购自北京中国医学科学院实验动物中心)。在20℃～22℃，湿度(55±5)%的环境下分开饲养1周，维持正常的昼夜规律，不限制水和食物的摄入。

1.1.2实验仪器与试剂 培养皿、剪刀、离心机、细胞过滤器、流式细胞仪、超净台、CO2培养箱、胶原酶D溶液、生物素化的小鼠树突细胞富集混合物、RPMI 1640培养基(含10%胎牛血清、青霉素100IU/mL和链霉素100IU/mL)。

1.2实验②方法 ①创伤模型制作：用戊巴比妥钠对小鼠进行麻醉，小鼠仰卧位固定在操作台上，在平行于腹部左腹内斜肌和左腹横肌的皮肤上形成4～5mm的小切口，分离开肌肉与血管暴露股骨干，用持针钳碾碎股骨干，然后分层进行缝合。……