标本放置时间、离心时间以及溶血与否对凝血检测结果的影响分析

吴刚

临床上用于观察抗凝治疗效果、血栓形成的常用指标包括Fib、APTT、TT、PT,凝血四项指标的检测对临床疾病的诊治有重要的参考和指导作用,对研究凝血机制有积极的意义［1,2］。保证检测结果准确性的关键是实验的标准化,但在实际中,受各种因素的影响,比如保存温度、送检时间等,都可能使试验检测结果发生改变。为探究标本放置时间、离心时间以及溶血与否对凝血检测结果的影响,特选取本院180例凝血功能正常患者的血液检测样本进行研究,现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取本院2018年6～12月的180例凝血功能正常患者的血液检测样本,所有参与检测样本均为健康血液样本,并且患者均明确研究目的,签署知情同意书。参与研究患者中男90例,女90例；年龄20～30岁,平均年龄(24.1±3.2)岁。

1.2 方法 采用全自动血凝仪,对质控用品、试剂等进行检测。所有参与者保持轻松的状态,在同等条件下进行血液采集,于早餐前空腹采血,每例患者均抽取6份5 ml的血样。采用109 mmol/L枸橼酸钠抗凝剂,血液和枸橼酸钠的比例是9∶1。抽出血液后,将其放入有抗凝剂的真空采血管中。选取3份血样分别放置1、2和4 h进行Fib、APTT、TT、PT水平的检测。另外3份血样进行不同离心时间的实验,分别离心5、10、15 min,离心机速度均为3000 r/min,获取上层血浆进行检测。在离心分离的标本中,如果用肉眼可见,血浆中有溶血的为溶血标本,对溶血标本和未溶血标本进行区分,并检测其凝血四项指标。

1.3 统计学方法 采用SPSS20.0统计学软件对数据进行处理。计量资料以均数±标准差()表示,采用t检验。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同放置时间血液标本凝血检测结果比较 放置4 h血液样本的TT水平(12.31±1.11)s低于放置2 h血液样本的(14.95±1.20)s与放置1 h血液样本的(16.79±1.28)s,放置2 h血液样本的TT水平低于放置1 h血液样本,差异均具有统计学意义(P<0.05)；放置4 h血液样本的APTT水平(31.56±3.62)s高于放置2 h血液样本的(26.03±3.45)s与放置1 h血液样本的(25.23±3.36)s,放置2 h血液样本的APTT水平高于放置1 h血液样本,差异均具有统计学意义(P<0.05)；放置1、2、4 h血液样本的PT、Fib水平两两比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

2.2 不同离心时间血液标本凝血检测结果比较 离心5 min血液样本的PT、APTT水平均低于离心10 min血液样本和离心15 min血液样本,离心15 min血液样本的PT、APTT水平均低于离心10 min血液样本,差异均具有统计学意义(P<0.05)；离心5、10、15 min血液样本的Fib、TT水平两两比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

2.3 溶血与未溶血血液标本凝血检测结果比较 凝血检测后,溶血血液标本的PT、Fib、APTT水平均明显低于未溶血血液标本,且TT水平明显高于未溶血血液标本,差异均具有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表1 不同放置时间血液标本凝血检测结果比较()

表1 不同放置时间血液标本凝血检测结果比较()

注：与放置1 h比较,aP<0.05；与放置2 h比较,bP<0.05

表2 不同离心时间血液标本凝血检测结果比较()

表2 不同离心时间血液标本凝血检测结果比较()

注：与离心5 min比较,aP<0.05；与离心10 min比较,bP<0.05

表3 溶血与未溶血血液标本凝血检测结果比较()

表3 溶血与未溶血血液标本凝血检测结果比较()

注：与溶血比较,aP<0.05

3 讨论

凝血检测结果的准确性和可靠性受多方面因素的影响,比如样本的存储时间、试剂的使用、操作规范等,标本溶血是最常见的一种因素。本次研究显示,放置4 h血液样本的TT水平(12.31±1.11)s低于放置2 h血液样本的(14.95±1.20)s与放置1 h血液样本的(16.79±1.28)s,放置2 h血液样本的TT水平低于放置1 h血液样本,差异均具有统计学意义(P<0.05)；放置4 h血液样本的APTT水平(31.56±3.62)s高于放置2 h血液样本的(26.03±3.45)s与放置1 h血液样本的(25.23±3.36)s,放置2 h血液样本的APTT水平高于放置1 h血液样本,差异均具有统计学意义(P<0.05)；放置1、2、4 h血液样本的PT、Fib水平两两比较差异无统计学意义(P>0.05)。离心5 min血液样本的PT、APTT水平均低于离心10 min血液样本和离心15 min血液样本,离心15 min血液样本的PT、APTT水平均低于离心10 min血液样本,差异均具有统计学意义(P<0.05)；离心5、10、15 min血液样本的Fib、TT水平两两比较差异无统计学意义(P>0.05)。凝血检测后,溶血血液标本的PT、Fib、APTT水平均明显低于未溶血血液标本,且TT水平明显高于未溶血血液标本,差异均具有统计学意义(P<0.05)。反映了不同放置时间、离心时间以及溶血与否都会改变凝血检测结果,标本放置时间过长,TT会缩短,APTT会延长。离心时间过短,PT、APTT会缩短。出现溶血问题的标本,PT、Fib、APTT会缩短,TT会延长。在血液采集过程中,要注重保证质量,准确标写患者的姓名和编号,并使患者处于空腹状态,以及心情放松的平静状态,减少对标本质量的影响。最好在实验室内采血,或者血液采集后及时送到实验室,在运送的过程中,防止日光直射,防止剧烈的震动,并且要避免有异物进入［3-5］。还要注意运送的温度,防止对血小板的损伤。最好在1 h内分离血浆,全血贮存在4～10℃不能>2 h。富含血小板血浆在室温22～24℃,可以存放2 h。如果在检测前发现溶血,需要重新采集。

标本的放置时间、离心时间和是否溶血都会影响凝血的检测结果。仪器设备的使用与运行、操作水平、采集水平、试剂的选择等,都是相关因素。其中任何一个环节出现问题,都会对检验的质量产生影响。因此,在检验过程中需要注意,专业处理样本,合理选择抗凝剂种类和剂量,有效控制样本量然后离心操作［6-8］。离心要合理选择离心时间和离心机速度,尽量避开白细胞的血浆层,或者脂质,然后吸取血清。在采集血液样本前,需要告知患者注意事项。采集样本时,患者要保持平静。实验室内采血,避免进入异物、阳光直射、震动剧烈等。做好隔离消毒措施。规范操作,防止血液标本出现异物污染、过度震荡等。避免出现溶血,加强各环节的处理和保存。标本在存放时,在室温下保存。4～10℃全血贮存≤2 h。避免温度过度,缩短APTT和 TT。离心在室温20～25℃下。在室温 22～24℃中,可以存放2 h富含血小板血浆［9,10］。如果检测前,发现有血块、溶血,需要立刻停止检测,重新采集,标本采集与离心中,注意预防溶血。

综上所述,不同的放置时间、离心时间和是否溶血,都会对凝血检测结果产生影响。因此要注意操作的规范性,把握合适的时间,确保检测结果的准确性。