TWIST与E-Cadherin的表达水平与宫颈癌患者病理情况的相关性分析

孙 少 霖

(开封市妇产医院 开封 475000)

宫颈癌的发病主要与遗传基因有关，多因素长期的共同影响最终导致宫颈癌的发生[1]。如何早期发现宫颈癌并找寻用基因的手段切断肿瘤形成的中间环节对于宫颈癌的预防、治疗以及预后具有重大意义。据相关文献报道[2～3]，宫颈的上皮间质转化(EMT)是宫颈癌形成中的重要环节，该转化直接或间接协助肿瘤细胞侵犯子宫及邻近器官或使肿瘤细胞易于发生转移。而E-Cadherin蛋白作为细胞膜上的重要标记物，在EMT中又发挥着至关重要的作用，同时也有学者指出，TWIST基因的表达水平对判断宫颈疾病是否恶变具有实际意义。在前人研究的基础上，本研究进一步探讨TWIST与E-Cadherin的表达水平与宫颈癌患者病理情况的相关性分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取本院于2017年10月～2018年11月收治的40例宫颈癌患者设为研究组(n=40)，并招募40例身体健康的志愿者设为对照组(n=40)。其中研究组平均年龄(51.49±3.11)岁，按组织类型分为鳞癌31例，腺癌9例；按有无转移分为有转移23例，无转移17例；按宫颈癌分化程度分为低分化26例，中分化9例，高分化5例。对照组志愿者平均年龄为(42.38±6.72)岁。两组患者的年龄以及研究组的组织类型、是否转移以及分化程度等临床资料均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 研究方法

两组研究对象取样标本均经甲醛固定、脱水以及石蜡包埋等常规方法处理，每片标本均为4μm，用柠檬酸盐电解质修复并用3%的过氧化氢溶液抑制过氧化物酶的活性，采用E-Cadherin兔单克隆抗体和TWIST兔单克隆抗体，运用二步免疫组化染色法进行检测，用二步法免疫组化试剂盒，严格按照试剂盒的操作流程进行，对E-Cadherin和TWIST的单克隆抗体进行处理，之后在恒定室内温度下30min，用苏木精进行复染。用正常兔IgG分别作为E-Cadherin以及TWIST的阴性对照，用已经确认的阳性切片作为E-Cadherin蛋白以及TWIST基因的阳性对照。用同样的试剂检测所有切片，保证实验的可靠性。

1.3 观察指标

由两位工作经验10年以上的病理科医生随机选取5个视野，每个视野200个细胞，同时选用高倍镜(400×)对所有切片进行观察，全部观察细胞的平均值根据染色的强弱做量化评估。(1)TWIST：观察其细胞质染色情况分为强阳性、弱阳性以及阴性；(2)E-Cadherin：观察其细胞膜染色情况分为小于10%染色为阴性(无色)；10%～70%染色为弱阳性(淡黄色)；大于70%染色为强阳性(黄褐色)。

1.4 统计学分析

两组数据均采用SPSS20.0数据软件进行统计学分析。计数资料以[n(%)]表示，采用χ2检验，以P<0.05表示差异有统计学差异。

2 结果

2.1 两组研究对象TWIST的表达水平

研究组患者的TWIST表达水平(阳性率)较对照组志愿者的TWIST阳性率明显升高，以上数据差异均具有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 两组研究对象TWIST的阳性率[n(%)]

2.2 两组研究对象E-Cadherin的表达水平

研究组患者的E-Cadherin表达水平(阳性率)较对照组志愿者的E-Cadherin阳性率明显降低，以上数据差异均具有统计学意义(P<0.05)，见表2。

2.3 相关性分析

根据Spearman方法结果显示，宫颈癌组织中TWIST和E-Cadherin的表达水平呈明显负相关(r=-0.536，P<0.05)。

表2 两组研究对象E-Cadherin的阳性率[n(%)]

3 讨论

TWIST是一种目前新发现的转录因子，在EMT中发挥着至关重要的调控作用，常在未分化的组织中进行表达，主要作用为使上皮细胞表型的表达水平下调，同时使间质细胞表型的表达水平上调，诱导上皮细胞发生恶性转变[4]。TWIST基因对宫颈癌细胞发生血运转移具有重要的调控作用，同时该基因也是宫颈癌预后的重要评估指标。本研究结果显示，研究组患者的TWIST表达水平(阳性率)较对照组志愿者的TWIST阳性率明显升高，即在正常子宫颈组织以及宫颈癌组织中均有TWIST基因的表达，且TWIST基因表达水平随病变恶性程度的提高而提高，以上数据差异均具有统计学意义(P<0.05)。

E-Cadherin蛋白的主要作用为维持各个细胞间的黏附功能，据相关文献记载[5～6]，E-Cadherin蛋白与β-catenin结合形成的复合物可以有效阻止恶性肿瘤细胞的浸润以及转移，而在发生EMT时，E-Cadherin蛋白表达水平下调或不表达导致细胞的黏附性降低，同时该过程也引发了β-catenin经通道进入细胞质的活动，进而促进EMT的转导通路，产生协同效应。本研究结果显示，研究组患者的E-Cadherin表达水平(阳性率)较对照组志愿者的E-Cadherin阳性率明显降低，以上数据差异具有统计学意义(P<0.05)。

本研究结果表明，宫颈癌组织中TWIST和E-Cadherin的表达水平呈明显负相关，该结果表明TWIST的表达水平和E-Cadherin的表达水平随着宫颈癌形成以及恶化的进展而变化。在二者的变化过程中，由r值可以推出TWIST和E-Cadherin互相影响，呈明显的负相关关系。存在于E-Cadherin上的E-box序列可以被TWIST基因识别，从而使E-Cadherin的表达水平下降，导致细胞间的黏附性降低，易于癌细胞浸润转移。

综上所述，TWIST表达水平的升高以及E-Cadherin表达水平的降低是早期判断宫颈是否恶变的重要指标，对于早期宫颈癌的诊断以及评估宫颈癌的预后具有重大意义。