儿童重症支气管肺炎发生过程中NF-kB、RORγt和FOXP3转录因子的表达差异研究

许惠敏 马 娜

(开封市儿童医院重症医学科 开封 475000)

支气管肺炎(Bronchopneumonia)是临床上常见的儿科呼吸系统疾病，多是由细菌、病毒、肺炎支原体等感染所引起的疾病[1]。近年来，有相关数据显示，重症支气管肺炎发病率逐渐呈低龄化的趋势，且儿童的发病率逐年增高，约占社区获得性肺炎的发病率的10%～30%[2]。核因子-kB( NF-kB)是一种与炎症介质产生、细胞增殖、细胞外基质交联和细胞凋亡有关的转录因子,参与了多种炎症反应的信号转导过程[3]。炎症早期招募嗜中性粒细胞，在气道黏膜参与防御病原菌感染及介导慢性炎症等多个重要生理或病理过程，RORγt和FOXP3是其特异性转录因子[4]。本次研究就对儿童重症支气管肺炎患儿血清中的NF-kB、RORγt 、FOXP3转录因子表达差异进行探讨，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016年11月～2017年12月我院收治的支气管肺炎患儿70例，根据病情程度分成非重症支气管肺炎组(23例)以及重症支气管肺炎组(47例)。重症支气管肺炎组纳入标准：(1)年龄3月～5岁，平均年龄(18.09±5.81)月；(2)符合中华医学会儿童分会呼吸学组2013年制定的《儿童社区获得性肺炎管理指南》中对重症支气管肺炎诊断标准。排除标准：(1)患有肝肾系统、心脑系统、血液系统以及免疫系统等严重功能障碍；(2)患有川崎病以及合并其他系统感染性疾病；(3)患有严重精神类疾病不能配合研究者。所有患儿家属均已签署知情同意书，并表示对研究内容理解，本次研究已获得我院伦理委员会批准。两组患儿在年龄、性别等一般资料的比较上均未见明显统计学差异，具有可比性。

1.2 方法

采用荧光定量PCR法分别对两组患儿的RORγt mRNA、FOXP3 mRNA、NF-kB DNA转录因子表达水平进行检测以及比较。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 两组 RORγt、FOXP3 mRNA表达水平以及NF-kB DNA结合活性比较

重症支气管肺炎组RORγt mRNA表达水平、NF-kB DNA结合活性显著高于非重症支气管肺炎组患儿，差异均存在明显统计学意义(P<0.05)；而FOXP3 mRNA表达水平明显低于非重症支气管肺炎组患儿，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 两组RORγt、FOXP3 mRNA表达水平以及NF-kB DNA结合活性比较

3 讨论

重症支气管肺炎是常见的儿童重症病房危重型疾病，由于儿童的免疫系统尚未完全发育完善，抵抗力低，因此儿童发生重症支气管肺炎的概率高，死亡率高，且易于流行[5]。有研究认为，导致重症支气管肺炎病情凶险且预后差的主要因素为患者机体内的炎症级联反应难以控制，重症支气管肺炎发生以及发展的最主要环节是机体内炎症反应基因表达的转录水平，而影响转录水平的关键则是转录因子的水平[6]。

细胞核因子NF-kB因具有激活免疫球蛋白 k轻链基因表达的能力而得名。现已证明它是一个多功能的转录因子，正常情况下NF-kB 和NF-kB的抑制因子IkB在细胞浆中形成稳定的复合物，而当细胞受到外界因素，如感染等刺激时，IkB发生磷酸化而降解，NF-kB则被活化，NF-kB和IkB分离并迅速移位至细胞核，与靶基因的启动子区域结合启动基因的转录和蛋白合成[3]。在重症支气管肺炎患儿血清中，NF-kB DNA结合活性显著高于非重症支气管肺炎组患儿，因此我们推测NF-kB在重症肺炎发病机制中起介导作用。

有研究证实，FOXP3 与RORγt之间的平衡决定CD4+T细胞的转化方向，FOXP3表达上调可以抑制RORγt表达，继而促进CD4+T细胞向Treg分化，抑制CD4+T向 Th17分化。FOXP3与 RORγt的稳态受到破坏可以诱导免疫反应的发生，引起Th17分泌IL-17等炎症因子增加[7]。本研究结果发现，重症支气管肺炎组RORγt表达水平显著高于非重症支气管肺炎组患儿，差异均存在明显统计学意义(P<0.05)；而FOXP3 mRNA表达水平明显低于非重症支气管肺炎组患儿，差异有统计学意义(P<0.05)。由此可以推测，当某种炎症因子引起重症支气管肺炎时，使患儿血清FOXP3蛋白下调，而RORγt蛋白和基因上调，引起CD4+T淋巴细胞向Th17分化，促进重症支气管肺炎的发生。

在本研究中，重症支气管肺炎组患儿的RORγt、NF-kB表达水平均显著高于非重症支气管肺炎组患儿，而FOXP3 mRNA表达水平低于非重症支气管肺炎组患儿，进一步说明儿童重症支气管肺炎发生发展与RORγt、FOXP3以及NF-kB DNA转录因子的表达密切相关。上调FOXP3蛋白和基因的表达，以及下调RORγt蛋白和基因表达可起到防治婴幼儿重症支气管肺炎的作用。