湛江农垦红江橙主产区2个果园黄龙病的巢式PCR检测分析①

赵丽宏 刘建荣 张曼其 刘伟清 吴 凡 冯学娟

(广东省湛江农垦科学研究所 广东湛江524086)

柑橘黄龙病（HLB）是柑橘生产上的毁灭性病害，是由一种革兰氏阴性细菌引起的，最早是在广东省潮汕地区被发现的。该病害主要发生在非洲、亚洲、美洲和大洋洲等50多个柑橘种植国家［1］。中国柑橘黄龙病主要发生在江西、云南、四川、福建、广东等11个柑橘生产省（市、自治区）［2］。该病害主要通过柑橘木虱、带病的苗木、接穗等传播，能侵染柑橘属、枳属、金柑属和九里香等多种芸香科植物［3-4］。由于黄龙病的病原菌是较难培养的细菌，因此分子水平上的研究一直无法深入开展，直至2009年才获得黄龙病亚洲种全基因组序列［5］。早期通过观察植株典型症状来进行黄龙病的田间形态学鉴定，具有一定的主观性。随着分子生物学的发展，目前主要采用PCR技术来检测黄龙病的病原菌。Nested PCR是一种变异的聚合酶链式反应。程保平等［6］使用常规和巢式PCR 2种方法分别对同一样本进行检测，发现巢式PCR的检测灵敏度大于常规PCR。

红江橙是新会甜橙和福桔嫁接后形成的嵌合体植株，是一个早结、丰产、品质良好的红肉甜橙新品种［7］，同时也是湛江农垦的特色和名优产品。由于其果肉红润、味道香浓、口感宜人，果皮薄滑、光亮，品质上乘，成为中国出口创汇水果佳品［8］。红江橙是红江农场科技人员在1971年发现并培育而成的变异单株，于1972年开始选育种植，到1990年种植面积已达到1.33万hm2［9］。后来由于黄龙病的大面积发生，红江橙种植面积下降至0.19万hm2，对湛江农垦红江橙产业造成很大的经济损失，直到2008年才开始恢复种植［10］。……