血浆B-catenin 作为甲状腺乳头状癌诊断标志物的价值分析

赵瑞鹏

（南京医科大学附属淮安第一医院 江苏 淮安 223300）

甲状腺癌的发病率越来越高且有年轻化的趋势，其中最常见的是乳头状癌（PTC），目前甲状腺癌常用的诊断方法主要有超声、CT 等影像学诊断方法，另外也细针穿刺取细胞学诊断等方法，而细针穿刺是诊断准确性最高的[1]。B-cat 蛋白（B-catenin）主要在细胞信号转导Wnt 通路中起作用，有起到促进恶性肿瘤增殖的作用，通过刺激癌细胞黏附，在恶性肿瘤转移中起重要作用[2]。有文献报道，B-catenin 在甲状腺乳头状癌患者癌组织中有过表达[3]。而也有文献报道血浆中可以测出B-catenin 蛋白的浓度[4]。鉴于此，本研究通过搜集并测定甲状腺乳头状癌患者血浆中B-catenin 蛋白的浓度，探讨其作为无创诊断标志物的价值，旨在为临床诊断甲状腺乳头状癌提供新的方法。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选取我院2016 年1 月—2018 年12 月诊断为甲状腺乳头状癌的55 例作为实验组，选取同期50 名体检的健康志愿者为对照组，无肝肾功能异常，所有患者均依据《NCCN 甲状腺癌诊疗指南》行手术治疗，术后均有明确石蜡病理诊断，所有甲状腺乳头状癌的病理诊断均由我院病理科一名副主任医师做出。术后按照指南推荐行左甲状腺素替代及抑制治疗或碘131 同位素治疗。

1.2 ELISA 测血浆B-catenin 蛋白

所有受试者血浆样本均在接受治疗前采集，并放置在－80℃冰箱备用，B-catenin 蛋白浓度使用上海宇淳生物科技有限公司的Elisa 试剂盒测试，方法安装试剂盒说明书进行。具体步骤如下：

（1）加样本：设置标准孔、空白孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl。覆膜，37℃孵育90 分钟。（2）吸尽液体，加工作液 100μl，酶标板覆膜，37℃ 孵育 1 小时。（3）吸尽液体，PBS 洗4-6 次。（4）、每孔加辣根过氧化物酶工作液100μl，加上覆膜，37℃孵育30min。（5）吸尽液体，洗板4 ～6 次。（6）每孔加底物90μl，酶标板加上覆膜37℃避光孵育15min。（7）加终止液50μl。（8）立即用酶标仪在450nm 波长测量各孔的光密度（OD 值）。

1.3 统计学方法

采用SPSS25.0 统计软件进行统计学分析。不同组间的计量参数比较使用t 检验，使用ROC 曲线及曲线下面积（AUC）检验B-catenin 蛋白是否可以作为甲状腺乳头状癌诊断标志物，曲线下面积小于0.7 没有诊断价值，0.7 ～0.79 有中等诊断价值，0.8～0.89 有较好的诊断价值，0.9 ～1 诊断价值最好，使用ROC曲线计算Cut-off 值，以P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2.结果

2.1 对照组与实验组血浆B-catenin 蛋白浓度水平比较

对照组血浆B-catenin 蛋白浓度为83.12±9.88pg/mL，实验组血浆B-catenin 蛋白浓度为215.14±21.9 pg/mL，实验组血浆B-catenin 蛋白浓度高于对照组，差异具有统计学意义（P ＜0.05），见表1。

表1 两组血浆B-catenin 蛋白浓度水平比较（±s）

表1 两组血浆B-catenin 蛋白浓度水平比较（±s）

例数 B-catenin（pg/mL） P t对照组 50 83.12±9.88 ＜0.05 5.98实验组 55 215.14±21.9

2.2 血浆B-catenin 指标对甲状腺乳头状癌的诊断价值分析

以本资料为样本，实验组55 例为阳性样本，对照组50例为阴性样本。ROC 曲线分析结果如图1 所示，曲线下面积AUC=0.837（P=0.001），表明血浆B-catenin 蛋白作为甲状腺乳头状癌特异性诊断指标价值较好。当Cut-off 值为71.6pg/mL 时，敏感性为81.2%，特异性为73.1%，提示B-catenin 有较好的诊断应用价值。

图1 血浆B-catenin 蛋白诊断甲状腺乳头状癌的ROC 曲线

3.讨论

甲状腺结节是头颈外科最常见的疾病之一[5]，良恶性结节的治疗方案是完全不同的，因而对结节进行良恶性鉴别诊断是一个重要的临床问题，通常对于直径较小的良性结节不需要激进的手术治疗。而对于恶性结节，需要行根治性手术，通常至少需要切除一叶及峡部腺体及中央区淋巴结清扫，对于侧区有转移的需要行根治性清扫[6]。本结果显示，在甲状腺乳头状癌患者中，血浆B-catenin 水平显著高于健康志愿者，提示了B-catenin 可能在甲状腺乳头状癌的发生发展中起作用。本文通过计算绘制ROC曲线，提示血浆B-catenin 测定，对于甲状腺乳头状癌的诊断有良好的应用价值。尤其对于一些结节较小或合并钙化等细针穿刺存在假阴性可能的结节，具有较好的临床应用价值。