金华猪精液冷冻保存技术研究

章啸君，屠平光，项 云

(金华农业科学研究院，浙江 金华 321007)

1 引言

精液冷冻保存就是利用干冰(-79 ℃)、液氮(-196 ℃)或其它制冷设备作为冷源，将精液经过特殊处理后，保存在极低温度下，完全抑制了精子的代谢活动，使精子的生命在休眠状态下保存下来，升温后复苏而不失去受精能力，使精液达到长期保存的方法。这项技术极大限度的提高了优良种公畜的利用率，减少公畜的饲养量以及疾病的传播，有利于家畜品种的杂交改良，加快遗传进展。1956年，英国人ploge开始研究猪精液冷冻保存技术。在1950～1960期间的研究中，利用牛精液冷冻方法冷冻猪精液，解冻后的精子具有活力，但是没有受精能力[1]。 1970年，Ploge[2]首次报道，用腹腔手术授精法将解冻后的精子直接注入输卵管，获得83%的受精卵，并得到冻精生产的小猪。目前，猪精液冷冻保存技术与其他动物相比，虽然取得了一些进展，但仍然存在着冷冻技术程序复杂、冷冻后效果不稳定等问题。本试验通过对金华猪精液冷冻过程中，不同稀释液、冷冻及解冻方法等各个方面进行研究，从精子活力、畸形率和质膜完整率等方面来综合评价冷冻精液的结果，旨在探索优化出金华猪精液较好的冷冻和解冻方法，为建立实用化的金华猪精液冷冻保存程序提供参考，为今后在金华猪种质资源的保存和利用提供可靠的技术方法。

2 材料与方法

2.1猪精液来源 猪精液采自金华市农业科学研究院金华猪选育场金华猪种公猪。

2.2 主要试剂与仪器葡萄糖、柠檬酸钠、半胱氨酸、Tris等所用试剂均购自Sigma公司,红宝石精子记数板WT-2000C、精子程序冷冻仪与精液质量分析系统均购自北京田园奥瑞公司。……