血脂多糖结合蛋白、白介素-6和降钙素原对胎膜早破孕妇宫内感染的预测价值分析

张少华，周芹，万桂兰，马晓贞，尤小燕，刘雨晴

（郑州市中心医院产科，河南 郑州450000）

胎膜早破是临产前出现的胎膜破裂现象，发生率高达3.00%～4.00%，是诱发早产、致胎儿死亡的主要原因之一[1,2]。目前关于胎膜早破发生及发展机制尚未完全明了,可能与宫内感染、创伤、细胞凋亡和微量元素匮乏等因素有关,或是由多种因素共同作用的结果[3]。其中宫内感染已被广泛认为是胎膜早破形成的关键因素,且胎膜早破与宫内感染互为因果、互相促进，不利于改善妊娠结局、提高出生人口素质。加强胎膜早破孕妇宫内感染研究具有重要临床价值，尤其是早期预测至关重要，利于降低宫内感染率、胎儿窘迫率、脑神经损伤等严重并发症[4,5]。但部分胎膜早破孕妇宫内感染并非都出现相应的临床表现，如亚临床型孕妇[6]，由此增加了宫内感染早期预测难度。白细胞计数（WBC）和C反应蛋白（CRP）作为评价机体感染的传统炎症指标，能客观、有效反映感染程度，但其特异性和敏感度较差,无助于胎膜早破孕妇宫内感染早期预测[7]；病原学诊断虽能培养出致病菌，但周期过长[8]；病理学诊断仅能于产后才能明确,不利于胎膜早破孕妇宫内感染预测，延误了最佳治疗时机，易造成不良结局。筛查和探寻一种更有效、更敏感、特异性更强的指标,对预测胎膜早破孕妇宫内感染临床价值不凡。本研究选取血脂多糖结合蛋白（LBP）联合白介素-6（IL-6）、降钙素原（PCT）预测胎膜早破孕妇宫内感染，其优势明显，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2015年12月至2018年3月本院胎膜早破宫内感染孕妇118例，为A组，年龄22～34 岁、平均（29.50±3.00）岁，孕周 36～42 周、平均（38.00±1.50）周，初产妇 75 例、经产妇 43 例，均为单胎。于同期再收集胎膜早破未出现宫内感染孕妇 64例，为B组，年龄 21～35岁、平均（29.00±2.78）岁，孕周 37～42 周、平均（38.50±1.70）周，初产妇41例、经产妇23例，均为单胎；健康孕妇190例作对照，为 C组，年龄 21～35岁、平均（30.20±2.80）岁，孕周 36～41 周、平均（38.30±1.95）周，初产妇121例、经产妇69例，均为单胎。纳入标准：⑴胎膜早破符合《妇产科学》标准[9]，①阴道窥阴器直视下可见羊水聚集,手触及宫底，羊水自宫颈流出；②pH试验为碱性；③阴道后穹隆液体涂片检查可见胎脂样物质或胎儿上皮细胞等。⑵宫内感染符合以下标准，①临床诊断：孕妇心率100次/min以上，胎儿心率160次/min以上，孕妇体温37.8°C以上且除外脱水、系统感染；子宫出现紧张和压痛，羊水或阴道分泌物可闻到臭味。②实验室标准：WBC15×109/L以上，CRP20mg/L或每天以 30%比例升高。③病理学标准：绒毛膜板、羊膜上白细胞弥散性聚集，每高倍镜视野可见5～10个中性粒细胞浸润且以极性分布为主。④病原学标准：羊水、胎膜或宫腔培养出病原菌。⑶自然受孕且既往身体健康。⑷具备一定听说读写能力。⑸）于本院进行相应孕检且记录完整。排除标准：⑴妊娠期间合并高血压、糖尿病、前置胎盘、胎盘早剥等严重并发症。⑵存在呼吸道、泌尿道等潜在感染迹象及免疫系统疾病。⑶近一周存在糖皮质激素、免疫调节剂、抗菌药物使用史。⑷近两周有外阴和阴道冲洗和用药史、性生活史。⑸胎膜早破难以除外人为等影响研究的相关因素。经比较，三组孕妇在年龄、孕周、胎次等指标均无显著差异,可以匹配比较（P＞0.05）。

1.2 方法 WBC、CRP、LBP、IL-6、PCT水平检测 于次日清晨空腹抽取三组研究对象肘部静脉血6～8ml,分别置于含有EDTA-K2抗凝的采血管和无抗凝剂的红帽管中,采用台式高速离心机（德国Eppendorf,型号 5810R）以 3000r/min速度离心 10min;血浆IL-6测定采用双抗夹心-酶联免疫吸附法（ELISA法）;血浆PCT测定采用POCT荧光免疫分析仪，通过免疫发光夹心法定量测定，试剂盒均由武汉华美生物工程有限公司（CUSABIO）提供；血细胞计数测定采用深圳迈瑞公司BC-6900五分类血细胞分析仪检测；血清CRP测定采用i-CHROMA Reader免疫荧光分析仪，Bodi Tech Med IncorooratedC反应蛋白检测试剂盒由杭州丽珠医疗器械有限公司提供；血清LBP测定采用双抗夹心-酶联免疫吸附法（ELISA法）。

胎膜和胎盘标本组织病理学检查:产后取一块2cm×2cm胎膜和胎盘组织,固定于4%多聚甲醛中，采用石蜡包埋机（德国LETCA公司,型号EG1140 H）包埋、切片，通过HE染色，采用奥林巴斯电子显微镜（日本Olympus公司，型号BX51）观察标本组织,分析标本组织炎症细胞密集程度、浸润深度。

1.3 观察指标 比较三组研究对象WBC、CRP、LBP、IL-6、PCT水平及产后胎膜标本组织病理学检查结果。

1.4 评价标准[9]宫内感染程度：参考标本组织炎症细胞密集程度、浸润深度，轻度：显微镜高倍视野下可见少量中性粒细胞浸润,数量5～10个;中度:中性粒细胞数量11～30个；重度：中性粒细胞浸润数量超过30个且分布密集。

1.5 统计学分析 采用 SPSS17.0软件分析试验数据。计数资料用百分比（%）表示，构成比采用2检验；计量资料用均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用t检验，重复测量数据采用重复测量的方差分析法，组间两两比较采用LSD-t检验。绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线)。比较曲线下面积（AUC）大小,明确诊断灵敏度、特异度及最佳诊断点；AUC＜0.50为检测指标无预测诊断价值，AUC=1.0为最理想的检测指标，P＜0.05为比较差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组研究对象 WBC、CRP、LBP、IL-6、PCT 水平 A 组、B 组 WBC、CRP、LBP、IL-6、PCT 水平均高于C组，差异有统计学意义（P＜0.05）。A组高于B组，差异有统计学意义（P＜0.05）。 见表 1。

表1 三组研究对象WBC、CRP、LBP、IL-6、PCT水平

2.2 A组宫内感染程度不同者 WBC、CRP、LBP、IL-6、PCT水平 胎膜早破宫内感染中、重度孕妇WBC、CRP、LBP、IL-6、PCT 水平高于轻度感染孕妇，重度感染孕妇高于中度孕妇，差异均有统计学意义（P＜0.05）。 见表 2。

表2 A组宫内感染程度不同者WBC、CRP、LBP、IL-6、PCT水平

2.3 LBP联合IL-6、PCT早期预测胎膜早破孕妇宫内感染 ROC曲线特征 LBP、IL-6、PCT和 LBP联合 IL-6、PCT 曲线下面积（AUC）均＞0.50。 见表3。

表3 LBP联合IL-6、PCT早期预测胎膜早破孕妇宫内感染ROC曲线特征

2.4 LBP联合IL-6、PCT水平检测对胎膜早破孕妇宫内感染的早期预测价值 LBP联合IL-6、PCT水平检测早期预测胎膜早破孕妇宫内感染敏感度、特异性、阳性预测值、阴性预测值均高于LBP、IL-6、PCT单一指标检测,差异均有统计学意义（P＜0.05）。 见表 4。

表4 LBP联合IL-6、PCT水平检测对胎膜早破孕妇宫内感染的早期预测价值（%）

3 讨论

随着对胎膜早破孕妇宫内感染研究深入，不断发现既往的传统感染指标，如WBC、CRP已无法有效满足目前临床所需,致胎膜早破宫内感染孕产妇无法及时得到有效诊断而延误了感染控制时间[10,11];且2/3疑似宫内感染孕妇被给予大量诊断性检查和抗菌药物防控干预,致有限的医疗资源被浪费且增加了孕产妇经济负担,所以胎膜早破孕妇宫内感染早期预测成为亟待解决的问题[12,13]。近年来研究表明胎膜早破孕妇宫内感染前已经存在早期病原菌的入侵致局部炎症反应,所以病原菌感染的早期免疫反应阶段已经出现[14,15]，也为LBP水平检测是否能作为胎膜早破孕妇宫内感染早期预测指标奠定了理论基础。

基于上述原因,本研究选取LBP联合IL-6、PCT水平检测，试图明确在胎膜早破孕妇宫内感染早期预测方面，三者联合使用是否能弥补单一指标检测差距和传统炎症指标检测不足,从而为胎膜早破孕妇宫内感染早期预测提供一定理论依据。结果表明胎膜早破宫内感染孕妇WBC、CRP、LBP、IL-6、PCT水平均显著升高,且明显高于胎膜早破宫内未感染孕妇，说明LBP、IL-6、PCT与传统炎症指标一样均能反映宫内感染状况,具有同等评定价值。且胎膜早破宫内感染炎症程度重者WBC、CRP、LBP、IL-6、PCT水平高于感染程度轻中度者，中度者又高于轻度者，说明LBP、IL-6、PCT三项指标与传统炎症指标在反映感染炎症程度方面具有一致性,即均能反映感染严重程度，利于把握病情。如LBP是一种能与病原菌脂多糖结合的血浆蛋白，具有调节机体宿主抗病原菌入侵反应等作用，在革兰阴性菌免疫呈递方面存在重要价值[16]；一旦出现异常,病原菌脂多糖通过活化机体天然免疫功能而能促进IL-6等炎症细胞因子水平不断升高，而升高的IL-6又能启动LBP基因转录，加速LBP合成、分泌，所以LBP既能反馈诱导自身合成,又能促进和增加下游IL-6表达[17]（即便低水平状态LB P仍能放大炎症级联反应,诱发和加重感染）。PCT是一种无激素活性糖蛋白，半衰期25～30h、体内稳定性良好；正常生理状况下接近正常（检测结果＜0.5ng/ml），一旦感染可于1h内开始升高、12h达平台期、24～48h至高峰[18]。 另外，绘制 ROC 曲线，分析LBP、IL-6、PCT特征对胎膜早破孕妇宫内感染早期预测价值，结果表明LBP、IL-6、PCT单一指标和LBP联合IL-6、PCT的曲线下面积 （AUC）均＞0.50,说明三者水平单一检测或联合检测均有早期预测价值。但三者联合检测在早期预测胎膜早破孕妇宫内感染敏感度、特异性、阳性预测值、阴性预测值方面优于LBP、IL-6、PCT单一指标检测，说明LBP联合IL-6、PCT同步检测，利于增加胎膜早破孕妇宫内感染早期预测价值。

综上所述，LBP、IL-6、PCT水平检测对胎膜早破孕妇宫内感染早期预测价值优于传统炎症指标，且三者联合同步检测相互补充、优势明显，利于为临床提供更加全面的信息支持,保证母婴安全、改善妊娠结局。