PTK6 和c-erbB-2 在乳腺癌中的临床应用价值

吴韶娜

（山西省长治市第二人民医院，山西 长治）

0 引言

本研究采用非生物素EliVisionTMplus 二步法分别检测PTK6 和c-erbB-2 的阳性表达率与临床病理参数之间的关系以及二者之间的相关性，由于PTK6 蛋白和c-erbB-2 蛋白表达的相关性，很可能这些蛋白可以共同作为乳腺癌诊断及预后的标志物。

1 资料与方法

1.1 标本来源

标本来自厦门市某医院（2003 年2 月至2008 年5 月）接受乳腺癌手术的乳腺癌病例。依据2012 WHO 乳腺癌分类标准进行组织学分类：非特殊性浸润性导管癌116 例；对其进行组织学分级：Ⅰ级35 例，Ⅱ级63 例，Ⅲ级18 例。116例乳腺癌中86 例有淋巴转移，30 例无淋巴结转移。根据国际抗癌协会TNM 分期方案将乳腺癌分为：Ⅰ期40 例，Ⅱ期57 例，Ⅲ期19 例。另取癌旁乳腺组织52 例（距瘤边缘5 cm）做对照。所有标本均经两位病理科医生确诊。

1.2 检测方法

所有标本经1 0% 中性福尔马林固定，石蜡包埋，4 μ m 连续切片，采用二步法检测：①石蜡切片脱蜡至水；②柠檬酸抗原修复液（0.01 M，pH6.0）对组织进行高压加热抗原修复；③滴加一抗工作液，4 ℃过夜，PBS冲洗3 次（3 min/ 次）；④滴加增强剂，室温孵育20 min，PBS 冲洗3 次（3 min/ 次）；⑤滴加二抗，室温孵育30 min，PBS 冲洗3 次（3 min/ 次）；⑥DAB 显色、苏木素复染、封片。用已知阳性标本作阳性对照；以PBS 代替一抗作阴性对照。

1.3 结果判断

所有切片均采用双盲观察，阳性百分率采用半定量判断标准，即选5 个不同高倍视野，每个视野计数100 个细胞，计算出其中阳性细胞的百分率。阳性细胞数＜10% 为（-），10%～25%为（+），26%～50%为（++），＞50%为（+++）。临床乳腺癌患者分子靶向治疗常采用免疫组化法c-erbB-2+++作为评定标准。

1.4 统计学处理

采用SPSS 20.0 软件进行数据统计，各组间率比较采用χ2检验，数据相关性分析采用Spearman 秩相关分析，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 PTK6、c-erbB-2 蛋白在乳腺不同组织学类型中的表达

如表1 所示，116 例浸润性乳腺癌组织中，有68 例PTK6蛋白呈阳性表达，其阳性表达率为64.7%，而52 例乳腺癌旁组织中，有8 例蛋白阳性表达，阳性表达率为15.4%，结果提示，PTK6 蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率显著高于乳腺癌旁组织，差异有统计学意义（P＜0.05）；116 例浸润性乳腺癌组织中，有57 例c-erbB-2 蛋白呈阳性表达，其阳性表达率为49.1%，52 例乳腺癌旁组织的阳性表达率为19.2%，结果提示，c-erbB-2 蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率显著高于乳腺癌旁组织，差异有统计学意义（P＜0.05）。

表1 PTK6 和c-erbB-2 蛋白在乳腺不同组织学类型中的表达（n, %）

2.2 浸润性乳腺癌中PTK6、c-erbB-2 蛋白阳性表达与临床病理特征之间关系

如表2 所示，PTK6 蛋白阳性表达随着组织学分级的增加而增高，组织学分级Ⅰ级和Ⅱ- Ⅲ级的阳性表达率分别为48.6% 和71.6%，经统计学处理，差异有统计学意义（P＜0.05），而在肿瘤直径、年龄、临床分期、淋巴结转移以及ER、PR 受体分组之间差异无统计学意义。c-erbB-2蛋白阳性表达在组织学分级、临床分期和淋巴结转移分组之间差异有统计学意义（P＜0.05），而在其余几项分组之间差异无统计学意义，见表2。

2.3 PTK6 与c-erbB-2 蛋白在浸润性乳腺癌组织中表达的相关性分析

如表3 所示，在75 例PTK6 蛋白阳性表达的浸润性乳腺癌组织中，c-e r b B-2 蛋白的阳性表达率为5 7.3%（4 3/7 5）；41 例PTK6 蛋 白 阴 性 表 达 的 浸润性乳腺癌组织中，c-erbB-2 蛋白的阳性表达率为34.1%（14/41），有统计学意义（P＜0.05）。Spearman 相关分析表明二者密切相关（rs=0.222，P＜0.05），见表3。

3 讨论

乳腺癌是女性中最常见的恶性肿瘤，乳腺癌发病率逐年上升，目前已成为我国女性发病率最高的恶性肿瘤，且有低龄化趋势[1]。分子标志物在乳腺癌诊断、判断预后和治疗方案中的价值越来越受到人们的重视。愈来愈多的证据表明，HER 家族成员参与乳腺癌发生发展，而与c-erbB-2 有关联的一些蛋白也成为了研究的热点[2]。

表2 浸润性乳腺癌组织中PTK6、c-erbB-2 蛋白阳性表达与临床病理特征之间的关系（n, %）

表3 浸润性乳腺癌组织中PTK6 蛋白与c-erbB-2 蛋白表达的相关性（n）

PTK6 在乳腺癌细胞和大约2/3 的原发性乳腺癌组织中表达升高，但在正常的乳腺上皮组织表达低或检测不到，这表明PTK6 可能与乳腺组织癌变有关[3]。本研究进一步探讨了PTK6 蛋白表达与c-erbB-2 蛋白表达之间的关系，经spearman 相关分析，结果显示，PTK6 蛋白表达与c-erbB-2蛋白表达呈正相关，即随着c-erbB-2 蛋白阳性率的增高，PTK6 蛋白阳性率亦增高，这也是为什么c-erbB-2 阳性表达的乳腺癌患者疗效不佳的原因之一。

综上所述，PTK6 蛋白和c-erbB-2 蛋白在乳腺癌中的表达较正常乳腺组织明显增加，且与组织学分级有关，提示其可能在乳腺癌的发生、发展中起着重要的促进作用，PTK6蛋白和c-erbB-2 蛋白在乳腺癌中表达呈正相关，从而提示PTK6 蛋白可能是上调c-erbB-2 蛋白表达的一种激酶，在HER 表达的乳腺癌细胞的信号转导中可能发挥重要的作用，因此在乳腺癌靶向治疗中，PTK6 可能会成为细胞质治疗靶点，PTK6 蛋白可能会成为乳腺癌新的标志物。但目前关于PTK6 在乳腺癌发生发展中的作用、预后意义以及与受体酪氨酸激酶家族的关系研究甚少，今后本研究小组将侧重于PTK 与HER 受体的信号通路研究，可为乳腺癌的临床治疗开辟新的途径。