胸腔积液和腹水清蛋白检测假性增高1例

李德涛，周 密，侯玉磊△

重庆医科大学附属第一医院：1.检验科；2.药学部，重庆 400016

胸腔积液和腹水总蛋白测定是鉴别渗出液和漏出液的重要指标之一[1]，一般认为胸腔积液和腹水总蛋白高于25 g/L为渗出液，低于25 g/L则为漏出液[2]。清蛋白在胸腔积液和腹水中的检测主要用于提示血清-清蛋白梯度，能够比较真实地反映门静脉压力，有利于提高胸腔积液和腹水性质鉴别的准确性[3-4]。基于溴甲酚绿的比色法检测清蛋白水平操作简单，特异性强，目前在国内常用于清蛋白的水平检测。本院检验科发现基于溴甲酚绿比色法检测胸腔积液和腹水清蛋白假性增高1例，现报道如下。

1 资料与方法

1.1临床资料 患者，女，25岁，因肝部肿瘤住院。患者因上腹部腹胀伴恶心1周入院。查体：体温36.5 ℃，心率98次/分，呼吸18次/分，血压113/72 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)。辅助检查：妇科彩超显示肝右前叶实性占位，增强CT显示肝右前叶肝左外叶占位。血清肝功结果：总蛋白64 g/L、清蛋白38 g/L、总胆红素(TBIL) 14.9 μmol/L、丙氨酸氨基转移酶(ALT) 160 U/L、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)105 U/L。该患者胸腔积液和腹水外观呈浅绿色，在全自动生化分析仪RL7600上进行生化检验，检测结果为总蛋白 46.6 g/L、清蛋白 533.3 g/L、TBIL 15.7 μmol/L、乳酸脱氢酶(LDH) 1 876 U/L、腺苷脱氨酶(ADA) 28 U/L。因该胸腔积液和腹水标本清蛋白水平高于总蛋白，根据清蛋白反应曲线初步怀疑为清蛋白假性增高，分别用稀释不同倍数的生理盐水、其他患者血清，以及胸腔积液和腹水标本进行检测。

1.2方法 本次检测分别在本实验室3个检测系统下进行总蛋白和清蛋白浓度检测：系统1为日立7600仪器加四川迈克单试剂，系统2为罗氏Cobas c701封闭检测系统，系统3为强生干化学Vitros 5.1 FS封闭检测系统。以上检测系统清蛋白的检测实验原理均是基于溴甲酚绿的比色法。

2 结 果

2.1该标本使用不同方法稀释在系统1的总蛋白和清蛋白结果 系统1使用不同稀释液稀释后检测该标本后总蛋白和清蛋白结果见表1，经不同稀释液稀释，随着稀释倍数增加，总蛋白无趋势性变化，但清蛋白结果逐渐降低。随着稀释倍数增加，不同稀释方法下清蛋白均呈趋势性降低，由此推测该标本使用系统1清蛋白检测可能存在干扰。见图1。

2.2该胸腔积液和腹水使用不同方法稀释在不同检测系统总蛋白和清蛋白结果 在系统2和系统3上检测该标本发现，清蛋白结果均小于总蛋白结果，符合预期。但2个系统清蛋白结果相差较大。见表2。

表1 使用不同稀释液稀释系统1总蛋白和清蛋白结果(g/L)

表2 使用不同稀释液在3个检测系统中的总蛋白和清蛋白结果(g/L)

注：-表示此项无数据。

图1 不同方法稀释胸腔积液和腹水后不同稀释倍数下清蛋白结果

3 讨 论

胸腔积液和腹水中检测清蛋白有利于胸腔积液和腹水良恶性的判断，溴甲酚绿是检测清蛋白水平最常用的方法之一[5-6]。溴甲酚绿的检测原理是在pH4.2左右的缓冲溶液里，溴甲酚绿与清蛋白结合形成蓝绿色复合物，蓝绿色复合物颜色的深浅与清蛋白的浓度成正比。据此可计算样本中清蛋白的水平[7-8]。然而在本案例中，基于单试剂的开放检测系统1胸腔积液和腹水清蛋白结果高于总蛋白结果，这有违常识，经观测胸腔积液和腹水颜色同试剂颜色比较相似，初步推测该异常结果可能受标本颜色的影响，胸腔积液和腹水本底对清蛋白的检测造成了影响。但分别使用生理盐水，已知结果的血清、胸腔积液和腹水标本稀释该胸腔积液和腹水标本后在检验科3个检测系统上进行检测，最大稀释到10倍，经计算检测系统1无论哪种稀释方法清蛋白结果均大于总蛋白，且稀释倍数越大，清蛋白结果越低。系统2和系统3检测结果显示该胸腔积液和腹水标本清蛋白低于总蛋白，符合常识，但不同稀释方法和稀释倍数下相差较大。另外发现，使用胸腔积液和腹水稀释的系列结果偏差最小，可能与本底效应相关。有研究报道，基于溴甲酚绿的单试剂受标本质量的影响比较大，而双试剂受影响相对较小，并且双试剂在抗维生素C和血红蛋白干扰中强于单试剂[9-10]。另外，基于溴甲酚绿方法检测清蛋白的试剂在一定程度上受标本中非清蛋白类的其他蛋白的干扰，如α和β类球蛋白的非特异性干扰[11]。但是本研究缺少该胸腔积液和腹水蛋白电泳的结果，以及基于免疫比浊法检测清蛋白的结果，没有办法排除该胸腔积液和腹水是否存在其他球蛋白影响检测结果。

综上所述，对于基于溴甲酚绿检测清蛋白的方法，出现异常结果时，可选择双试剂检测系统或者干化学试剂检测系统，也可做基于免疫法的清蛋白检测，以综合判断，为临床医生出具真实可靠的结果以供诊断病情。