快速检测发酵乳中葡萄糖杆菌的赖解旋酶恒温基因扩增方法的建立

刘 东，张 捷，朱华东，周 巍*，张 岩*

（河北省食品检验研究院，河北省食品安全重点实验室，河北 石家庄 050091）

发酵乳是乳及其加工制品在特征性微生物的作用下发酵生成的酸性凝乳状制品，特点是保质期内所含特征菌大量存在，并且能够保持活性继续存活[1-2]。发酵乳不仅含有原料乳中全部的营养成分，其添加的益生菌也在互利生长的同时赋予发酵乳更丰富的营养价值和保健作用[3-4]。随着社会的飞速发展及生活水平的不断提高，人们对食品的关注点已经从安全、满足需求转向养生、保健[5]。发酵乳因自身特有的营养和保健功能，关注度和受喜爱程度越来越高，成为当今乳制品研究与开发的主要方向[6]。

发酵乳因pH值较低、含有较多益生菌，使得广大消费者误认为发酵乳本身相对较为安全[7]。但是实际情况不尽其然，发酵乳富含蛋白质、乳糖等营养成分，容易受到微生物繁殖、代谢的影响，从而导致腐败变质[8]。葡萄糖杆菌常见于糖含量较高的环境中，造成发酵乳的污染[9-10]。发酵乳中葡萄糖杆菌的质量控制需要精准的检测技术体系作为支撑。

目前常见的食品中葡萄糖杆菌检测方法主要为传统常规培养生理生化法和分子生物学检测方法。常规生理生化检测方法需要进行增菌、分离，检测周期长，费时费力，且存在漏检现象，很难满足市场快速、准确的检测需求。常规聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）技术存在扩增反应时间长、扩增效果受到多种因素影响、常引起非特异性扩增、需要昂贵的PCR仪等缺陷，导致其难以在基层推广应用[11]。……