不同浓度血管内皮细胞生长因子对人牙周膜干细胞内皮向分化的影响

石 笑，赵寅华，赵 萤，程百祥，陈永进，张 旻

2004年Seo等[1]利用克隆筛选和免疫磁珠分离的方法分离获得了牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells, PDLSCs)，并证实其具有高度自我更新能力和多向分化潜能，能够分化为牙周膜组织中具有特定功能的细胞群，包括成骨细胞、成纤维细胞和成牙骨质细胞，继而形成骨、成牙骨质及牙周膜纤维结构[1-6]。

对于牙齿撕脱性损伤来说，如何促进延迟再植脱位牙获得理想的牙周膜性愈合，一直以来都是该领域的研究热点与难点。本课题组在前期研究中发现，补充外源性PDLSCs能明显提高脱位再植牙牙周膜性愈合位点的数量，提示自体干细胞的移植可能会成为延迟再植脱位牙牙周损伤修复的新方向[7]。同时，我们还发现，经BrdU标记的外源性PDLSCs明显参与了新生牙周膜组织中毛细血管管壁的形成，且干细胞植入组中毛细血管的数量多于对照组[7]。上述现象进一步提示我们，PDLSCs的内皮向分化及血管的形成可能是其促进撕脱性损伤患牙牙周愈合的关键因素。

然而，为了得到PDLSCs内皮向分化诱导液的理想配比，给后续基于其内皮分化的一系列研究奠定基础，本研究拟采用含有不同浓度血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)的内皮向分化诱导液对人PDLSCs的分化效果进行对比研究，以期筛选出适宜的诱导液和诱导时间，为PDLSCs应用于牙周组织修复和再生提供实验依据和理论基础。

1 材料与方法

1.1 主要材料与仪器

1.1.1 主要材料 α-MEM(HyClone公司，美国)，2.5 g/L胰酶(HyClone公司，美国)，Ⅰ型胶原酶(Sigma公司，美国)，胎……