LncRNA LUCAT1 在胰腺癌组织中的表达及其临床意义*

曹 维，朱 净，周国雄

（南通大学附属医院消化内科，江苏226001）

胰腺癌是高度侵袭性恶性肿瘤，超过80%胰腺癌在确诊时已是局部晚期或转移期[1]，5 年生存率仅3%[2]，中位生存时间 3～5 个月[3]。只有 10%～15%胰腺癌有机会手术切除[4]，但术后复发率高达75%～92%[5-6]。因此，发现有效的生物学标记对提高胰腺癌的诊断和治疗具有重要意义。

肺癌相关转录本1（lung cancer transcript 1，LUCAT1）是因为其通过抑制p21 和p57 表达促进非小细胞肺癌细胞增殖被首次发现而得名[7]，随后在膀胱癌、卵巢癌、非小细胞肺癌及肾透明细胞癌[8-9]等多种肿瘤中发现长链非编码RNA（LncRNA）LUCAT1的异常表达。本研究选取2012—2019 年我院普外经手术切除的80 例胰腺癌组织及其配对癌旁组织，分析胰腺癌组织LncRNA LUCAT1 的表达及其与临床病理参数的关系，探讨LncRNA LUCAT1 在胰腺癌发生、发展中的作用。

1 材料与方法

1.1 材料 手术切除、病理证实的80 例胰腺癌组织及其配对癌旁组织，置液氮罐冻存。Trizol 试剂盒（美国 Invitrogen 公司），反转录试剂盒、MixPCR 扩增试剂盒（Fermentas 公司）。PCR 引物采用Primer5.0软件设计，由Invitrogen（上海）公司合成。

1.2 方法

1.2.1 RNA 抽提：将组织剪成小碎块，放入研钵中加入液氮迅速反复研磨。取100 mg 组织加入1 mL Trizol 后转移至1.5 mL 无RNA 酶EP 管中。电动匀浆器充分匀浆1～2 min，室温静置5 min，12 000 r/min离心5 min，加入200 mL 氯仿充分混匀振荡后，12 000 r/min，4 ℃离心 5 min。吸取 400 μL 上层包含 RNA的水相，转移至新的EP 管中，加入500 μL 异丙醇充分混匀，于-20 ℃冰箱静置1h 以增加沉淀。1 2000 r/min，4 ℃离心15 min，弃上清保留沉淀，继续加入4 ℃预冷的75%无水乙醇1 mL，混匀后再次7 500 r/min，4 ℃离心5 min。 重复一次乙醇洗脱步骤，尽可能弃净上清。通风橱干燥5～10 min，待管壁乙醇完全挥发后加入25 μL DEPC 水，充分溶解管底RNA。……