蓝斑介导右美的镇痛镇静作用的神经机制研究

施 伍，贾 欣，梁 悦，胡丹丹，王烈成，张 玲

右美托咪定(dexmedetomidine, DEX)是一种高选择性α2肾上腺素受体激动剂，广泛应用于临床的辅助麻醉和重症监护[1-2]。DEX具有明显的镇静和镇痛作用[3- 4]，然而其镇静和镇痛的中枢机制尚未完全阐明。脑干蓝斑(locus coeruleus，LC)是脑内去甲肾上腺素能神经元聚集的主要核团，由LC发出的纤维向上可以到达皮层广泛区域参与觉醒和睡眠，由LC向下发出的纤维到达脊髓构成内源性的疼痛下行抑制调控环路[5-6]。大量的研究[7-9]表明DEX在脑内的作用的主要靶点是LC且DEX和吗啡具有协同作用[10]。现利用在体电生理技术在自由活动的小鼠上记录系统性给予不同剂量DEX对LC神经元放电的影响，并结合行为学和药理学实验，研究DEX的镇痛和镇静作用的关系和中枢机制。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂DEX购自江苏恒瑞医药有限公司；纳洛酮购自上海爱必信公司；育亨宾购自美国Sigma公司。c-Fos一抗购自美国abcam公司；p-ERK一抗购自美国CST公司；二抗购自美国Invitrogen公司。实验动物选用成年健康的SPF级雄性C57BL/6小鼠，体质量20～25 g，共52只，由上海市实验动物资源中心(西普尔-必凯公司)提供，按照实验动物管理条例进行饲养，动物实验方案经上海同济大学动物伦理委员会批准。

1.2 方法

1.2.1机械缩足阈值的测定 提前将小鼠放入高架金属网底板的铁笼中适应30 min。测试时，用Von Frey纤维丝垂直刺小鼠后爪脚底，各纤维丝之间需间隔5 s，小鼠在受刺激时若出现快速抬足、抖足或舔足中的任意一种现象，此次刺激反应即被视为阳性反应，用up-down方法统计分析小鼠机械缩足阈值。……