重庆卷丹病毒检测与脱毒方法研究

符勇耀,杨利平,高海洪,徐文姬,雷美艳,王安祥

(1.长江师范学院 现代农业与生物工程学院，重庆 408100； 2重庆市药物种植研究所，重庆 408435)

卷丹(LiliumlancifoliumThunb.，2n=3x=36)又名宜兴百合、虎皮百合，是百合属(LiliumL.)多年生球根类植物，在中国分布范围极广[1]。作为自然存在的三倍体，卷丹不仅食药用价值高，还是重要的花卉之一，深受广大消费者喜爱。湖南龙山、江苏宜兴和安徽霍山是中国卷丹的主产区[1-2]。在重庆地区海拔1000m左右山地生长广泛，具有独特的地理和气候条件，近年来，在重庆南川、黔江和秀山等区县大面积引种湖南卷丹，种植面积已达0.16万hm2，年产量约3万t，初步形成产业规模。然而，卷丹在栽培过程中多采用无性繁殖，造成病毒不断累积，使植株发生病毒病，严重危害其产量和品质。目前已报道侵染百合的病毒达19种以上，其中最主要的病毒为百合斑驳病毒(Lilymottlevirus, LMoV)、黄瓜花叶病毒(Cucumbermosaicvirus,CMV)和百合无症病毒(Lilysymptomlessvirus, LSV)[3-4]等。这3种病毒通常以其中2种或3种同时侵染百合植株，给百合生产造成严重问题[5-7]。利用化学药剂或生物制剂难以对病毒病进行有效防治，直接利用百合脱毒苗已成为控制病毒病的重要措施[4, 8-9]。因此，建立一种针对卷丹的脱毒快繁技术，对其产业发展具有重要意义。

目前百合脱毒技术主要以百合微茎尖培养为主，并结合其他处理方式。王超等[10]通过对5种百合脱毒研究发现，即使以0.3～0.5mm 最适脱毒长度的茎尖进行培养，CMV脱毒率不足65%，而LSV不足50%，且成活率为57.62%。高慧卿等[11]将百合组培苗65℃高温预处理30min后，剥取0.2～0.5mm茎尖进行脱毒培养，CMV和LSV的脱毒率分别为46.88%和74.65%，但平均成活率不到60%。……