Prohibitin表达及对乳腺癌细胞系MCF-7抑制生长的机制研究

周晓艳，李 越，何 谦，袁晓红，张海宝

（1. 西安交通大学第二附属医院检验科，西安 710004； 2.西安交通大学环境与疾病相关基因教育部重点实验室，西安 710061）

抗增殖蛋白（Prohibitin，phb/PHB)，是一种高度保守的蛋白质，因具有增殖抑制作用而得名，分PHB1 和PHB2 两个亚型[1]。在自然界中分布广泛，参与人类肿瘤的增殖、转录、分化、凋亡及能量代谢等过程，与细胞衰老、免疫调节、代谢性及炎症性疾病亦紧密联系。在细胞内作为重要的分子伴侣参与线粒体结构和功能的完整性[2]。近年来乳腺癌发病率及死亡率逐年升高，而 PHB 在乳腺癌组织中表达升高[3]，提示可能成为乳腺癌早期筛查新的生物标志物，可作为乳腺癌诊疗的重要靶点[4,5]。本课题组在前期蛋白质组学的研究中发现，核基质蛋白PHB 在正常乳腺组织、乳腺增生性病变组织、不典型上皮增生组织和乳腺癌组织4 个乳腺癌不同阶段表达逐渐升高[6]，并鉴定了PHB 干扰在乳腺癌MCF-7 中低表达的效果[7]。此次研究验证了PHB 的高表达，以及PHB 在乳腺癌细胞MCF-7 的生物学功能及生长抑制机制，为乳腺癌的临床诊断、治疗和药物研发提供新靶标和新的研究线索。

1 材料与试剂

1.1 细胞株来源 人乳腺癌MCF-7 细胞保留了多个分化了的乳腺上皮特性，该研究中MCF-7 受赠与西安交通大学第一附属医院妇产科实验室。

1.2 主要试剂 胎牛血清和DMEM 高糖培养基购于HyClone 公 司，LipofectamineTM2000 为Invitrogen 公司产品，扩增试剂为青岛Takara 公司产品，Anti-prohibitin 抗体（ab47778）和兔抗人β-actin（ab6276）均为英国Abcam 公司购买，周期及凋亡试剂盒购于武汉凯基生物有限公司，BALB/C 裸鼠来自西安交通大学实验动物中心 。……