HBsAg新增N-糖基化突变的研究进展*

傅晓春，叶辉铭(厦门市妇幼保健院医学检验科，福建厦门 361003)

HBV作为一种含不完全闭合双链的DNA病毒，至今在全球仍约有2.4亿慢性感染者[1]。HBsAg作为HBV感染常见的筛查标志物，与HBV DNA定量检测的联合应用能更好地监测患者的HBV感染自然史，基线HBsAg水平可帮助改进免疫调节治疗和核苷类似物(nucleotide analogues, NAs)治疗的方案[2]。然而，近年较多报道HBsAg上存在一种新增N-糖基化(N-linked glycosylation)突变，可对其自身抗原性、病毒复制力、宿主免疫应答和HBV相关肝脏疾病进程产生影响[3-15]，可能影响疫苗接种、HBV检测及临床治疗评估[5-8,10,12-15]。因此，本文对此作一综述，以指导乙肝疫苗的改良、HBsAg检测试剂的研发、降低HBV传播风险并优化临床治疗策略。

1 HBsAg的新增N-糖基化突变及其检测

N-糖基化是一种在内质网(endoplasmic reticulum，ER)和高尔基体(golgi apparatus，GA)中进行的新生肽链的翻译后修饰方式，其修饰位点须有一致的氨基酸序列N-X-S/T(N为天冬酰胺，X为脯氨酸以外的任意氨基酸，S为丝氨酸，T为苏氨酸)，因此可以依靠质谱分析和数据库检索手段实现大规模位点鉴定[16-18]。N-糖基化的蛋白质结构复杂，缺少特征的吸收光谱，通常情况下为电中性，并且虽然其是生物体内普遍发生的一种翻译后修饰，但丰度通常较低，需要经过凝集素亲和法、酰肼化学法、亲水作用色谱法及硼亲和法等进行富集[19]，并通过分子荧光标记、放射性标记法、抗体标记、化学衍生和凝集素标记等进行衍生化，使之具有荧光特性、紫外吸收或其他一些可测定的物理化学性质，才能实现深度覆盖分析[20]。

HBV进入肝……