紫杉醇单独或与甲氨蝶呤联合用药对关节炎的治疗作用及其机制*

盛正和，曾 健，黄 文，李 玲，李斌斌，吕 超，颜凡棋

1.柳州市人民医院 中医科(柳州 545006)；2.广西中医药大学 研究生院(南宁 530001)

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)是一种病因未明的以炎性滑膜炎为主的系统性慢性疾病，基本病理改变是滑膜炎、晚期关节畸形和功能障碍，严重影响患者生活质量[1]。甲氨蝶呤(methotrexate, MTX)是临床治疗RA应用广泛的抗风湿药物之一，已成为RA 联合用药方案的基础药物[2]。但MTX单独使用时，疗程较长，容易导致副作用增加，部分患者不能耐受[3]。紫杉醇(paclitaxel, PTX)作为从红豆杉树皮中提取的一种双萜类伪生物碱，能影响机体一系列重要细胞免疫和炎症活动[1]。研究[4]发现，PTX 可以缓解胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis, CIA)大鼠关节肿胀程度，改善RA症状。PTX和MTX作为关节炎治疗的潜在有效药物，二者联合用药对RA治疗效果及作用机制还不清楚，故本实验采用胶原诱发建立大鼠CIA模型，给予 MTX和PTX不同剂量单独或联合给药观察疗效，对MTX、PTX对RA的作用机制进行深入研究，旨在为临床治疗RA提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 主要药物及试剂 PTX(阿拉丁试剂，P106868-10 mg)；MTX(阿拉丁试剂，M111239-500 mg)、Ⅱ型胶原蛋白、弗氏完全佐剂(美国Sigma公司)；大鼠IL-1β、IL-6、IL-12、TNFα ELISA试剂盒(武汉博士德工程有限公司)；MMP-3 ELISA试剂盒(北京诚林生物科技公司)；ECL发光试剂盒、β-Actin 抗体、辣根过氧化物酶标记山羊抗免IgG、辣根过氧化物酶标记山羊抗小鼠IgG(北京中杉金桥公司)；TLR4、p-NFκBp65抗体(英国Abcam公司)；BCA蛋白定量试剂盒(美国Thermo公司)。

1.1.2 主要仪器 BX51T-PHD-J11型显微镜(日本奥林巴斯公司)；RM2015型切片机(德国莱卡公司)；计算机图像处理系统CMOS(日本奥林巴斯公司)；……