毛细管电泳法测定天麻素对乙酰胆碱酯酶活性的抑制

张 剑, 张 博, 贺茂芳, 韩 禄, 高东羽, 刘春叶

(西安医学院药学院, 陕西 西安 710021)

乙酰胆碱酯酶(AChE)是生物神经传导中的一种关键性酶。在胆碱能突触间,该酶能降解乙酰胆碱,终止神经递质对突触后膜的兴奋作用,保证神经信号在生物体内的正常传递[1]。

阿尔茨海默症是引起中老年人痴呆最常见的疾病,AChE抑制剂(AChEI)是当前治疗该疾病的主要药物[2]。AChEI的药理作用是抑制AChE的活性,从而维持神经系统中乙酰胆碱的正常水平。因此,AChEI的筛选研究受到了广泛关注[3-7]。目前,其筛选方法有比色法[8]、薄层色谱法(TLC)[9]、高效液相色谱法(HPLC)[10]、质谱法(MS)[11]、荧光法[12]等等。由于毛细管电泳(CE)具有分离模式多、分离效率高、样品消耗少等优点,近年来被广泛应用于酶学研究及抑制剂筛选等相关领域[13-18]。分段注入酶和底物溶液的毛细管电泳介导酶微反应器技术操作简单,实现了反应和检测的一体化,但每次运行需更换新的酶溶液塞[15-16,18]。开管毛细管固定化酶微反应器可重复使用、易调控,近年来受到广泛关注。靶标酶的固定化可通过共价键[13,14]和离子键[17]来实现,共价键法所得酶反应器稳定性好,但制备过程耗时较长,与之相比离子键合法则操作简单快速。

建立快速地从天然产物中筛选AChEI的方法,将对临床治疗阿尔兹海默症有积极的作用。天麻在临床上被广泛应用于阿尔兹海默症、帕金森、中风、眩晕等脑部神经损伤性疾病的治疗。作为天麻的重要药效成分之一,天麻素能够抑制AChE的活性,增加脑内乙酰胆碱的含量。……